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免疫磁珠技術

閱讀:2985        發布時間:2018/5/16
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免疫磁珠(Immunomagnetic bead, IMB)技術是 20世紀 80年代出現的技術方法。以免疫學為基礎,滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化及分子遺傳學等各個領域,其在免疫檢測、細胞分離、生物大分子純化和分子生物學等方面有著越來越廣泛的使用。
 

免疫磁珠的結構:

磁珠是由核心金屬顆粒(Fe2O3, Fe3O4), 核心外層包裹的高分子材料(如聚苯乙烯、聚氯乙烯)和zui外層的功能配基(如-NH2,-COOH、-OH、-CHO)組成。

免疫磁珠1.jpg

免疫磁珠在生物醫學領域的應用:

1. 細胞分選 免疫磁珠細胞分選可在幾分鐘內從復雜的細胞混合物中分離出很高純度的細胞。應用納米級的磁珠進行細胞分選時,磁珠的大小和它的組成成份使其可被生物降解,且不會激活細胞或影響細胞的功能和活力,細胞的生理功能也不變,因此磁性標記細胞可立即用于分析和隨后的實驗。


免疫磁珠2.jpg

細胞分選可分為:

a) 陽性分選(正選):磁珠結合的細胞就是所要分離獲得的細胞,適用于流式分析和基于細胞的分析。

b) 陰性分選(負選):磁珠結合不需要的細胞,游離于上清液的細胞為所需細胞。 正選(左)及負選(右)分別如下:


免疫磁珠3.jpg

磁分選細胞的重要指標: 純度和得率,這取決于磁珠所連接單抗的特異性和磁珠大小(磁性),然而太小的磁珠得率不高,太大的磁珠又會影響細胞活性,也無法直接上流式。

2. 蛋白質/抗體分離與純化 應用抗體(蛋白)包被的免疫磁珠純化技術無需復雜的層析設備,對樣品的澄清度無限制,只需要簡單的磁性吸附步驟即可很方便地從單抗表達產物中分離單抗,有效解決了傳統層析技術的不足之處。

免疫磁珠4.jpg

3. 核酸分離純化 核酸結合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。細胞或組織在裂解液作用下,其中的DNA/RNA被釋放出來。此時經過表面修飾的超順磁性氧化硅納米磁珠即與核酸進行“特異性結合”,形成“核酸-磁珠復合物”。然后在外加磁場的作用下,復合物即分離出來。可廣泛應用于分子生物學中的基因組研究、分子進化研究、醫學中遺傳病的研究、突變基因的檢測、腫瘤的篩查、HPV等的檢測、HLA分型、移植配型等、法醫學生物樣本血斑、精斑、頭發、煙蒂等現場證物的檢測、和司法上的親子鑒定、血緣關系的鑒定等提供證據、考古學、大中小學的生物試驗等許多領域。 


免疫磁珠5.jpg

4. 免疫檢測

免疫磁珠由于粒徑小,比表面積大,可捕獲較多的待測物,并直接在其表面進行酶顯色、熒光或同位素顯示,從而建立了一系列檢測速度快、特異性高、靈敏度高和重復性好的免疫檢測方法。

 

5. 其它應用: 在高梯度磁場下,用免疫磁珠法分離腹腔血或靜脈中B、T淋巴細胞,分離的淋巴細胞隨之在臨床器官yi植供受者的快速選配中有廣泛應用。進行HLA-I II類抗原分型。

磁珠技術作為一種交叉學科匯聚研發而成的產品,其在生物學及醫學實驗檢測中作用巨大。借助于二代測序的飛速發展,二代測序多涉及的耗材也迎來了它的春天。無論是用于提取核酸的磁珠,還是作用于細胞分選、免疫檢測所用的免疫磁珠,其在分子生物學領域仍然屬于行業的細分領域,其中的技術仍然在不斷進步發展中,隨著越來越多公司的加入,其研發的產品價格也將越來越便宜。

 


 

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