產品簡介：

氨基酸(AA)檢測試劑盒(茚三酮比色法)(Amino Acid Assay kit)檢測原理是在弱酸條件下，氨基酸與茚三酮共熱情況下能定量的產生藍紫色的二酮茚胺(又稱Ruhemans紫)，其吸收峰在波長570nm處，在一定范圍內顏色深淺(即吸光度)與氨基酸濃度成正比，該試劑盒主要用于檢測血清、尿液、植物組織、食品、藥品等中的總游離氨基酸含量。該試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。 

自備材料：

1、無氨蒸餾水或去離子水、60%乙醇

2、水浴鍋或恒溫箱、研缽或勻漿器

3、離心機、離心管或試管

4、比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考)：

1、配制 AA Lysis buffer (1×)：取 1 份 AA Lysis buffer (5×)加 4 份去離子水混勻即成。

1、準備樣品：

①植物樣品：取新鮮植物組織，清洗干凈，擦干，切碎，迅速稱取 0.4g，按植物組織：AA Lysis buffer(1×)=0.4g：2.0ml的比例加入AA Lysis buffer(1×)勻漿或研磨，用無氨蒸餾水稀釋至40ml，混勻，用濾紙過濾，濾液即為氨基酸粗提液，4℃保存備用。

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定，-20℃凍存，用于氨基酸的檢測。

③細胞或組織樣品：取恰當細胞或組織裂解液，如有必要用AA Lysis buffer(1×)進行勻漿，1000g離心5min，留取上清即為氨基酸粗提液，4℃保存，用于氨基酸檢測。

④高濃度樣品：如果樣品中含有較高濃度的氨基酸，可以使用AA Lysis buffer(1×)進行恰當的稀釋。

2、配制茚三酮顯色液:取0.3g茚三酮，溶解于50ml茚三酮稀釋液，攪拌至溶解，即為茚三酮顯色液。4℃避光保存，30天有效。注意：茚三酮顯色液30天用不完，應丟棄，重新配制。可稱取一定量的茚三酮再加稀釋液使終濃度為0.6%即可。

3、配制茚三酮工作液: 取適量的茚三酮顯色液、AA Assay buffer，按茚三酮顯色液：    AA Assay buffer=35：3的比例混合，即為茚三酮工作液，4℃避光密閉保存，2周有效。注意：AAAssay buffer所含物質濃度較高，且有刺激性，如有結晶或沉淀，應于40~70℃密閉溫育，使其溶解后使用。

4、配制維生素C工作液: 取出1支維生素C，準確溶解于30ml無氨蒸餾水，混勻，4℃預冷備用，-20℃保存1周有效。該試劑盒提供的維生素C及其配制的工作液為過量。

注意事項：

1、實驗材料應盡量新鮮，如取材后不立即測定，應存于4℃。

2、實驗中用水盡量保證不被氨污染，否則會強烈干擾反應。

3、如果樣品中含有大量蛋白質或多肽也會影響結果的準確性，應先用蛋白沉淀劑去除而后檢測，一般常用乙酸、磺基水楊酸、三等作為沉淀劑。AA Lysis buffer有蛋白沉淀劑的功能。

4、氨基酸與茚三酮顯色反應可用沸水浴15min，但易退色；在80℃水浴中孵育，并適當延長反應時間，可增強顯色效果。產生的藍紫色產物在1h內保持穩定，建議盡快檢測。

5、脯氨酸或羥脯氨酸的檢測，建議使用脯氨酸(PRO)檢測試劑盒(茚三酮比色法)。

6、AA Lysis buffer(5×)和AA Assay buffer有腐蝕性和揮發性，應小心操作，同時應密閉保存，防止揮發。

7、空氣中的氧有可能干擾顯色反應，盡量隔絕空氣。

8、加入維生素C可提高反應的靈敏度，并使顏色穩定，但加入過量，將導致吸光度人為偏大，應嚴格掌握加入的量。

9、如果沒有分光光度計，也可以使用酶標儀測定，但應考慮酶標儀的最大檢測體積。

10、所測樣品的濃度過高時，應用AA Lysis buffer稀釋樣品后重新測定。

有效期：6個月有效。4℃運輸，氨基酸標準收貨后應-20℃保存。