實驗摘要：

本研究旨在闡明細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2 (ERK1/2) 和p38 絲裂原活化蛋白激酶通路是否參與將施加在脂肪干細胞 (ASC) 上的機械拉伸轉(zhuǎn)導(dǎo)為細胞內(nèi)成骨信號，以及所以這兩種途徑是否都具有時間依賴性特征。

部分實驗內(nèi)容：

大鼠ASCs在成骨培養(yǎng)基中培養(yǎng)72小時，分為三組，即ERK1/2抑制劑處理組、p38抑制劑處理組和對照組。抑制劑處理后，所有細胞在四點彎曲機械加載裝置上進行循環(huán)拉伸（2000 με，1 Hz）。在六個時間點采集蛋白質(zhì)和 mRNA 樣品：0、15 分鐘、30 分鐘、1 小時、2 小時和 6 小時。

結(jié)果顯示，機械拉伸以時間依賴的方式促進 ERK 活性。ERK 活性在 ASC 機械加載 2 小時后達到峰值，磷酸化 ERK 與未磷酸化 ERK （p-ERK/ERK）的比率達到對照組的近 6 倍。所有拉伸處理組中ERK1/2的磷酸化水平顯著高于對照組。在拉伸應(yīng)用前兩小時用 10μM U0126處理細胞?*阻斷拉伸誘導(dǎo)的 ERK1/2 的激活，而SB203580不影響 ERK1/2 的磷酸化。

此外，P38的磷酸化以不同的方式受到影響。2 小時和 6 小時的機械加載不會激活 p38 通路，而短時間（15 分鐘、30 分鐘和 1 小時）的機械加載會顯著增加 p38 (p-p38) 的磷酸化水平。p38 活性在 30 分鐘時達到峰值。在拉伸應(yīng)用前兩小時用 20uM SB203580 處理細胞，抑制了拉伸誘導(dǎo)的p38的活性 ，而 U0126 不影響 p38 的磷酸化。

部分實驗結(jié)果：

機械刺激會促進 ERK1/2 和 p38 磷酸化

實驗結(jié)論：

本研究發(fā)現(xiàn)循環(huán)牽張力加載促進了 ERK1/2 和 p38 的磷酸化，并且應(yīng)用 ERK1/2 或 p38 抑制劑有效地阻止了機械拉伸對 ASC 成骨基因的上調(diào)。ERK1/2 在牽張力誘導(dǎo)的 BMP-2 和 Runx2 上調(diào)的早期和晚期都起作用，而 p38 僅在早期起作用，暗示 ERK1/2 和 p38 通路可能在牽張力誘導(dǎo)的成骨分化中發(fā)揮不同的作用，盡管他們都是該過程的積極監(jiān)管者。

參考文章：Zhang L, Wang Y, Zhou N, Feng Y, Yang X. Cyclic tensile stress promotes osteogenic differentiation of adipose stem cells via ERK and p38 pathways. Stem Cell Res. 2019 May;37:101433. doi: 10.1016/j.scr.2019.101433. Epub 2019 Apr 8. PMID: 31005788.

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