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上海拓紛機械設備有限公司
主營產品： 復合材料凍干機,新材料凍干機,乳制品凍干機,生物制劑凍干機 |
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2017-4-28 閱讀(1849)
細菌冷凍干燥機顧名思義是一種用于細菌、菌種、微生物等凍干保存的真空冷凍干燥機，也常常被稱為細菌凍干機、菌種冷凍干燥機、微生物冷凍干燥機。其操作步驟如下：
一、菌株準備及分裝
液體培養的菌種，經離心收集和用生理鹽水洗滌細胞，收集的菌體用保護劑（10ml脫脂牛奶中加1g米孢子粒）懸浮制成菌懸浮液。懸液中菌數要求達到108-1010個/ml為宜。懸液制備完成盡快分裝和凍結。分裝安瓿時可用滅菌長嘴毛吸管或長針注射器，每管分裝量約0.1-0.2ml（0.3-0.5ml，單管式冷凍管球形裝液區內的裝液量應為球體積的一半左右），分裝安瓿管時間盡量要短，在1-2小時內分裝完畢并且預凍，分裝時應注意在無菌條件下操作。
二、預凍
置于-80℃超低溫冰箱預凍1-2小時（也可直接選購-80℃低溫實驗室冷凍干燥機）。
三、 冷凍干燥
1. 將冷凍后的樣品安瓿管置于細菌冷凍干燥機上（先開機預冷30分鐘以上才開泵），開始冷凍干燥，時間一般為數小時。終止干燥時間應該根據以下情況判斷：安瓿管內凍干物呈酥塊狀或者松散狀；真空度接近空載時的zui高值；選用1-2支對照管，其水份與菌懸液同量，視為干燥完結。（注意：確認干燥后，要先開啟冷凍室的進氣閥，讓真空釋放，然后停泵，打開冷凍室，將冷凍干燥管取出。）
2. 真空封口
將安瓿管頸部棉塞以下處用強火焰拉細進行熔封。
四、 保藏
安瓿管保藏在-20℃超低溫冰箱中。
五、 活化
如果要從中取出菌種恢復培養，可先用75%酒精將管得外壁消毒，用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，，在安瓿管中加入0.5-1ml液體培養基，慢慢旋轉安瓿管，使凍干菌種復蘇，然后直接接種到瓊脂斜面或涂布平板。
文章編輯:上海拓紛機械設備有限公司｛搜索公司名即可找到我們｝
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