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上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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更新時(shí)間：2023-08-29 10:07:41瀏覽次數(shù)：1859
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上海細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn).
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法，可以用來(lái)檢測(cè)貼壁生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
上海細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn).實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
材料：6孔板（其他的也可以，但感覺6孔比較好，大小適中），MARKER筆，直尺，20微升槍頭（滅菌），無(wú)血清培養(yǎng)基，PBS
步驟：能滅菌的器械都要滅菌。MARKER筆，直尺在操作前紫外照射30MIN（超凈臺(tái)內(nèi)）
1.先用MARKER筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃?rùn)M線，大約每隔0.5-1cm一道，橫穿過孔，每孔至少穿過5條線。
2. 在空中加入約5*105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過液能鋪滿
3. 第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜
4. 用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無(wú)血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)，按0. 6 .12 24小時(shí)取樣，拍照。
注意事項(xiàng)：
一般做劃痕實(shí)驗(yàn)，一般都在無(wú)血清或者低血清狀態(tài)下培養(yǎng)的，否則細(xì)胞增殖就不能忽略
按照6孔板背后劃線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點(diǎn)，作為固定的監(jiān)測(cè)點(diǎn)，這就解決了前后觀察時(shí)位置不固定的問題。
