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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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更新時間：2025-05-09 17:06:10瀏覽次數(shù)：1848
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品系：優(yōu)先選用 BALB/c nu/nu 裸鼠（免疫缺陷，避免宿主免疫排斥），雄性為主（性別差異影響較小）。
年齡與體重：推薦4-6周齡，體重18-20 g（淋巴系統(tǒng)發(fā)育成熟，代謝穩(wěn)定）。
飼養(yǎng)條件：SPF級環(huán)境，單獨籠養(yǎng)（防止感染和zi殘）。
細(xì)胞株選擇：需根據(jù)研究目的選擇高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞系，例如：
結(jié)直腸癌：HCT-116（低分化腺癌，成瘤率100%，6周一級淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率100%）。
卵巢癌：SKOV3（定向淋巴道轉(zhuǎn)移，傳代后轉(zhuǎn)移率穩(wěn)定）。
舌鱗癌：Tca8113（轉(zhuǎn)移率67.5%）。
細(xì)胞懸液制備：
濃度：1×10? cells/mL（HCT-116）或4×10? cells/0.04 mL（SKOV3）。
活力要求：臺盼藍(lán)染色活細(xì)胞率>95%。
注射部位：裸鼠右后肢爪墊皮下（淋巴引流方向明確，一級至三級淋巴結(jié)依次為腘窩→腹股溝→髂血管旁→腎門）。
麻醉：1%lv胺酮腹腔注射（0.3 mL/只），5分鐘內(nèi)起效。
技術(shù)細(xì)節(jié)：
使用2號針頭緩慢注射，局部形成隆丘后退針（避免滲漏或淋巴管堵塞）。
注射后15分鐘裸鼠蘇醒，活動正常。
感染防控：必要時給予抗生素（如頭孢類）預(yù)防傷口感染。
監(jiān)測周期：每周測量腫瘤體積（公式：V=1/2×長徑×短徑2），觀察淋巴結(jié)腫大（觸診或活體成像）。
成瘤率：1周內(nèi)成瘤率可達(dá)100%（HCT-116）。
轉(zhuǎn)移時間窗：
一級淋巴結(jié)（腘窩/腹股溝） ：3周開始轉(zhuǎn)移，6周轉(zhuǎn)移率100%。
二級淋巴結(jié)（髂血管旁） ：5周轉(zhuǎn)移率20%，8周達(dá)60%。
三級淋巴結(jié)（腎門） ：8周后出現(xiàn)轉(zhuǎn)移（20%）。
遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移：通常無肺/肝轉(zhuǎn)移（模型特異性）。
HE染色：淋巴結(jié)髓竇區(qū)可見異型癌細(xì)胞浸潤（核大深染，核分裂象多見）。
免疫組化：
CEA（結(jié)直腸癌標(biāo)志物）：陽性表達(dá)證實轉(zhuǎn)移灶來源。
EMA/CK18（上皮標(biāo)志物）：用于舌鱗癌轉(zhuǎn)移鑒定。
疼痛行為學(xué)：Von Frey測痛儀檢測機械痛閾值變化（炎癥反應(yīng)指標(biāo)）。
影像技術(shù)：
Micro-CT：結(jié)合免疫磁珠增強信號，監(jiān)測早期微小轉(zhuǎn)移。
活體熒光成像：適用于標(biāo)記熒光蛋白的腫瘤細(xì)胞。
連續(xù)傳代篩選：取轉(zhuǎn)移灶細(xì)胞重復(fù)傳代（如SKOV3傳3代后轉(zhuǎn)移率穩(wěn)定）。
基因編輯：過表達(dá)促轉(zhuǎn)移因子（如VEGF-D增強淋巴管生成）。
輔助處理：切除帶瘤下肢（腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率從60%提升至80%）。
細(xì)胞接種量：優(yōu)化至4×10? cells/只（平衡成瘤速度與動物耐受性）。
時間節(jié)點：6周為典型觀察終點（一級轉(zhuǎn)移充分，二級開始擴(kuò)散）。
轉(zhuǎn)移機制：揭示淋巴管新生（如VEGFR-3通路）、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）等關(guān)鍵過程。
藥物篩選：評價抗轉(zhuǎn)移藥物（如卡培他濱抑制HCT-116轉(zhuǎn)移）。
影像技術(shù)驗證：測試新型示蹤劑對微轉(zhuǎn)移灶的檢測靈敏度。
免疫微環(huán)境缺失：裸鼠T細(xì)胞缺陷，無法模擬免疫逃逸過程（需聯(lián)合人源化模型）。
種屬差異：小鼠淋巴管結(jié)構(gòu)與人類存在差異（需結(jié)合3D類器官驗證）。
| 癌癥類型 | 細(xì)胞株 | 轉(zhuǎn)移特點（6周） | 應(yīng)用方向 | 文獻(xiàn)來源 |
|---|---|---|---|---|
| 結(jié)直腸癌 | HCT-116 | 腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率76.9% | 抗淋巴轉(zhuǎn)移藥物評價 | |
| 卵巢癌 | SKOV3 | 腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率100% | 轉(zhuǎn)移亞群篩選 | |
| 舌鱗癌 | Tca8113 | 腹股溝/腋窩轉(zhuǎn)移率67.5% | 轉(zhuǎn)移標(biāo)志物鑒定 |
裸鼠爪墊淋巴道轉(zhuǎn)移模型憑借操作簡便、轉(zhuǎn)移路徑明確和高重復(fù)性，成為研究腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的黃金標(biāo)準(zhǔn)。未來趨勢包括：
多組學(xué)整合：結(jié)合單細(xì)胞測序解析轉(zhuǎn)移異質(zhì)性。
動態(tài)監(jiān)測技術(shù)：開發(fā)高分辨率活體成像系統(tǒng)。
人源化改進(jìn)：引入免疫重建或類器官共培養(yǎng)系統(tǒng)。
