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HPLC色譜產(chǎn)品概述以及液相色譜基線漂移的原因

閱讀:2585      發(fā)布時間:2021-8-3
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   HPLC色譜概述
  液相色譜法(HPLC)是上個世紀(jì)七十年代迅速發(fā)展起來的一項快速的分析分離技術(shù),是現(xiàn)代分離測試的重要手段。
  色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
  HPLC是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,其以液體作為流動相,并采用顆粒極細(xì)的固定相的柱色譜分離技術(shù)。其分離機制與常規(guī)柱色譜相同,但填料更加精細(xì),需高壓泵推動,柱效高,分析速度快。
  與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程,其組成、比例和pH值可靈活調(diào)節(jié),分離模式多樣。在實際操作中主要通過改變流動相的組成來調(diào)節(jié)樣品在色譜柱的保留值和選擇性,從而使不同樣品得到分離。
  液相色譜法的應(yīng)用范圍十分廣泛,對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用液相色譜法分析測定,因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中,可用氣相色譜分析的約占20%,而80%則需用液相色譜來分析。
  液相色譜基線漂移的原因
  (1)柱的溫度波動。即使是微小的溫度變化也會導(dǎo)致基線波動。通常影響差異檢測器、電導(dǎo)檢測器、UV檢測器或其它光電類檢測器的較低靈敏度。
  (2)色譜流動相不均勻流動相條件變化,引起的基線漂移大于溫度變化引起的基線漂移。
  (3)污染或氣體循環(huán)池。
  (4)探測器出口堵塞。(高壓導(dǎo)致循環(huán)水池窗口的爆裂,產(chǎn)生噪聲基線)。
  (5)不正確的流量比或流量變化。
  (6)柱的平衡是緩慢的,特別是當(dāng)移動相發(fā)生變化時。
  (7)由低質(zhì)量的溶劑污染、變質(zhì)或制備。
  (8)個樣品具有較強的保留力(高K‘值)至汕頭峰。

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