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上海橋星貿易有限公司
主營產品： 進口透析袋,密理博ECL發光液,B27無血清培養基,Gibco膠原酶 |
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A1360 pGEM-T easy Promega試劑?
原裝*，質量保證，現貨供應
規格：1.2ug
A1360 pGEM-T easy Promega試劑? 產品描述：
組分：
pGEM®-T Easy Vector【子貨號：A137A，包裝：1 x 1.2μg，，運保溫度：-20℃】
Control Insert DNA【子貨號：A363A，包裝：1 x 12μl，，運保溫度：-20℃】
2X Rapid Ligation Buffer【子貨號：C671A，包裝：1 x 200μl，，運保溫度：-20℃】
T4 DNA Ligase【子貨號：M180A，包裝：1 x 100u，，運保溫度：-20℃】
描述：
pGEM® -T Easy 載體系統是克隆PCR 產物的方便系統。它除了具有pGEM® -T 載體系統(Cat.# A3600,A3610) 所有的優勢外，在插入位點兩側分別有EcoRI 和NotI 酶切位點，便于通過選擇單酶切釋放插入的DNA。pGEM® -T Easy載體系統II 除了pGEM® -T Easy載體系統I 所有成分外，還包括JM109 感受態細胞。
特點:
靈活：pGEM®-T Easy 載體多克隆位點兩側分別有BstZI, EcoRI和NotI 酶切位點，便于通過選擇單酶切釋放插入的DNA。
快速連接：使用2X 快速連接緩沖液(2X Rapid Ligation Buffer)可以使連接反應在室溫下1 小時內完成。
藍/ 白篩選：載體包含有T7 和SP6 RNA 聚合酶啟動子，分別位于β - 半乳糖苷酶的α - 肽編碼區內多克隆位點的兩側。α - 肽的插入失活允許在指示培養基上用顏色直接篩選重組克隆。
f1 復制起始位點：可用于制備單鏈DNA。
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 載體系統可用于PCR產物的克隆。這兩種載體是通過 EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM® -T Easy載體，并在3’末端加入胸腺嘧啶構建的。插入位點3’-T突出端可提高PCR產物的連接效率，因為3’-T突出端可以防止載體的自身環化，并且為熱穩定性聚合酶產生PCR產物提供匹配堿基。這些聚合酶常常以不依賴模板方式在擴增產物的3’端加上一個脫氧腺苷酸混合物。 pGEM®-T和pGEM®-T Easy高拷貝數載體包含有T7和SP6 RNA聚合酶啟動子，其側翼和多克隆位點區相接，多克隆位點區位于β半乳糖苷酶的α肽編碼區內。α肽插入失活允許在指示培養基用顏色直接篩選重組克隆。另外這兩個載體的多克隆位點區的限制性酶切位點適用于采用Promega公司Erase-a-Base®系統（產品目錄號#E5750）產生一系列巢式缺失體。
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 載體的多克隆位點區含有一些這樣的限制性酶切位點，采用這些酶進行單酶切消化即可釋放插入片段。如pGEM®-T Easy 載體多克隆區的EcoRⅠ、BstZⅠ和NotⅠ酶切位點。而pGEM®-T 載體多克隆區只有一種這樣的酶切位點BstZⅠ。這兩種載體也可選用適當的雙酶切消化釋放插入片段。
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 載體含有絲狀噬菌體f1復制起始子，可用于制備單鏈DNA
| 儲存條件 | 感受態細胞儲存于-70℃；其它組分儲存于-20℃ |
原廠資料：
The pGEM®-T and pGEM®-T Easy Vector Systems are convenient systems for the cloning of PCR products. The vectors are prepared by cutting the pGEM®-5Zf(+) and pGEM®-T Easy Vectors, respectively, with EcoR V and adding a 3´ terminal thymidine to both ends. These single 3´-T overhangs at the insertion site greatly improve the efficiency of ligation of a PCR product into the plasmids by preventing recircularization of the vector and providing a compatible overhang for PCR products generated by certain thermostable polymerases. These polymerases often add a single deoxyadenosine, in a template-independent fashion, to the 3´-ends of the amplified fragments.
The high copy number pGEM®-T and pGEM®-T Easy Vectors contain T7 and SP6 RNA polymerase promoters flanking a multiple cloning region within the alpha-peptide coding region of the enzyme beta-galactosidase. Insertional inactivation of the alpha-peptide allows recombinant clones to be directly identified by blue/white screening on indicator plates.
The pGEM®-T and pGEM®-T Easy Vector Systems include a 2X Rapid Ligation Buffer for ligation of PCR products. Reactions using this buffer may be incubated for 1 hour at room temperature. The incubation period may be extended to increase the number of colonies after transformation.
注意事項：
1． 在使用pGEM®-T 和pGEM®-T Easy 載體連接時只能使用本系統提供的
Promega 公司T4 DNA連接酶。其他商用的T4 DNA連接酶可能具有外切
酶活力，造成載體的末端胸腺嘧啶被除去。
2． ２×快速連接緩沖液含有ATP，在溫度波動時ATP易降解。可將緩沖液分
裝成一次用量的小管，這樣可避免反復凍融及經常的溫度變化。
3． 在每次使用２×快速連接緩沖液時一定要用混懸器混勻。
4． 長孵育時間可增加轉化子的數目，一般4℃孵育通宵可得到更多的轉化子。
5.一定要使用高效率的感受態細胞（1×108cfu/µg DNA）進行轉化，建議使用JM109 高效感受態細胞（產品目錄號：L2001）
? 相關產品列表：
| Promega 系列 | ||
| 序號 | 貨號 名稱 | 規格 |
| 1 | M1801 T4連接酶 | 100U |
| 2 | M1804 T4連接酶 | 500U |
| 3 | M1701 M-MLV | 10000U |
| 4 | M1705 M-MLV | 50000U |
| 5 | M5101 AMV | 300U |
| 6 | M5108 AMV | 1000U |
| 7 | M7741 Pfu | 100U |
| 8 | M7745 Pfu | 500U |
| 9 | C1101 Olig(dt)15 Primer | 20ug |
| 10 | M3001 Go-Taq | 100U |
| 11 | M3005 Go-Taq | 500U |
| 12 | M3008 Go-Taq | 2500U |
| 13 | U1511 dNTP | 200μl |
| 14 | U1515 dNTP | 1000μl |
| 15 | A1360 pGEM-T easy | 1.2ug |
| 16 | A3600 pGEM-T | 1.2ug |
| 17 | C1181 Random Primers | 20μg |
| 18 | N2511 Recombinant RNasin | 2500U |
| 19 | N2515 Recombinant RNasin | 10000U |
| 20 | N2611 RNasin Plus | 2500U |
| 21 | N2615 RNasin Plus | 10000U |
| 22 | N2111 RNasin | 2500U |
| 23 | N2115 RNasin | 10000U |
| 24 | M1871 TdT | 300U |
| 25 | M1875 TdT | 1500U |
| 26 | M2825 CIAP | 1000U |
| 27 | M1821 CIAP | 1000U |
| 28 | M2201 Klenow I | 150U |
| 29 | M2206 Klenow I | 500U |
| 30 | M4211 T4 DNA Polymerase | 100U |
| 31 | M4215 T4 DNA Polymerase | 500U |
| 32 | M4101 T4 Polynucleotide Kinase | 100U |
| 33 | M4103 T4 Polynucleotide Kinase | 1000U |
