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貨物所在地:上海上海市
所在地: 上海
更新時間:2025-02-06 15:53:15
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產(chǎn)品描述
李記生物研制的BCA蛋白定量試劑盒可對蛋白質(zhì)溶液進行高靈敏度比色定量,本試劑盒不受蛋白質(zhì)種類的影響。BCA(bicinchoninic acid)是一種穩(wěn)定的水溶性復合物,在堿性條件下,二價銅離子(Cu2+)可以被蛋白質(zhì)還原成一價銅離子(Cu+),一價銅離子可以和BCA相互作用,兩分子的BCA螯合一個一價銅離子,形成紫色的絡合物,該復合物為水溶性,在562nm處顯示強吸光性,在0.02~2 mg/mL濃度范圍內(nèi)蛋白質(zhì)濃度與吸光度值成線性關(guān)系,因此可以根據(jù)待測蛋白在562 nm處的吸光度計算待測蛋白濃度。
由于還原劑和螯合劑對反應有阻礙,因此本制品不適用于含有還原劑(如:β-巰基乙醇,DTT等)或者螯合劑(如EDTA)的蛋白質(zhì)樣品的定量。對表面活性劑的干擾影響小。可用于含有表面活性劑蛋白質(zhì)溶液的定量。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
BCA 蛋白定量試劑盒 | AP12L025 | 500T |
BCA 蛋白定量試劑盒 | AP12L026 | 2500T |
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品組成 | 包裝規(guī)格 |
AP12L025 | BCA試劑 A | 100 mL |
BCA試劑 B | 4 mL | |
蛋白標準(5 mg/mL BSA) | 1 mL | |
產(chǎn)品說明書 | 一份 | |
AP12L026 | BCA試劑 A | 250 mL×2 |
BCA試劑 B | 20 mL | |
蛋白標準(5 mg/mL BSA) | 1 mL×5 | |
產(chǎn)品說明書 | 一份 |
保存方法
冰袋運輸,BCA試劑A和B室溫保存,蛋白標準請-20℃凍存。保質(zhì)期12個月。
使用方法
*融化蛋白標準品,取適量蛋白標準品稀釋至終濃度為0.5 mg/mL。蛋白樣品使用什么溶液溶解,標準品也應用什么溶液稀釋,但是為了簡便起見,也可以用0.9% NaCl或PBS稀釋標準品。將標準品按0、1、2、4、8、12、16、20 μL加到96孔板的標準品孔中,加標準品稀釋液補足到20 μL,相當于標準品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。
根據(jù)樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。例如5 mL BCA試劑A加100 μL BCA試劑B,混勻,配制成5.1ml BCA工作液。 BCA工作液室溫24 h內(nèi)穩(wěn)定。
加適當體積樣品到96孔板的樣品孔中,也加稀釋液到20 μL。
各孔加入200 μL BCA工作液,37℃放置20~30 min。也可以室溫放置2 h,或60℃放置30 min。
測定A562吸光值,540~595 nm之間的波長也可接受。根據(jù)標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
注意事項
蛋白標準品配制后可立即使用,也可以-20℃長期保存。
BCA法測定蛋白濃度時,顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低,適合在較高溫度孵育或適當延長孵育時間以獲得更好檢測效果。
因為延長孵育時間會引起吸光值的變化,所以在用紫外分光光度計檢測時,應盡可能加快檢測速度,以免先檢后檢產(chǎn)生系統(tǒng)誤差。
標準蛋白液的加量應當準確,如果加量不準確,會導致制作出來的標準曲線出現(xiàn)偏差,影響待測樣品的濃度計算,所以一方面需要用梯度稀釋的方法來配置標準蛋白液,另一方面應使用準確度高的移液槍。
方法 | Bradford法 | BCA法 |
靈敏度 | 1~5 μg | 0.5~20 μg |
時間 | 5~15 min | 40~60 min |
波長 | 595 nm | 562 nm |
檢測不同類別蛋白質(zhì) | 變異系數(shù)較高 | 變異系數(shù)較低 |
吸光穩(wěn)定性 | 1 h內(nèi)穩(wěn)定 | 隨時間變化 |
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上海李記生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的高科技生物技術(shù)企業(yè),產(chǎn)品涵蓋細胞生物學、分子生物學、動物學等,我們的產(chǎn)品都基于*設計,在保證品質(zhì)的前提下,具有易用、經(jīng)濟、高效的特點。
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李記優(yōu)勢產(chǎn)品:蛋白Marker、EZ Trans細胞轉(zhuǎn)染液、CCK-8細胞活性增殖檢測試劑、支原體快速檢測試劑盒、核酸染料(GelRed)、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒、熒光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清、細胞凋亡檢測試劑盒等。