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液氮罐與細(xì)胞培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)院經(jīng)常需要長期需要儲存細(xì)胞。常規(guī)做法是將其置于液氮中冷凍（在常壓下，液氮溫度為－196℃），令細(xì)胞處于休眠狀態(tài)，從而延長細(xì)胞的生命。

我們都知道，細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境需要嚴(yán)格的無菌，盡可能避免細(xì)胞出現(xiàn)各類污染狀況。細(xì)胞在長期儲存過程中，雖然置于密閉的凍存管內(nèi)，對于外在環(huán)境的無菌要求，相對于37℃培養(yǎng)時(shí)會低一些，不需要嚴(yán)格的無菌，但依然要對液氮罐定期清潔，保證其潔凈、無雜物。

那么該如何對液氮罐進(jìn)行有效清潔呢？

液氮罐清潔

曾有研究人員用拭子涂抹取樣培養(yǎng)鑒定的方法，對使用超過一年以上的液氮罐進(jìn)行檢測微生物，發(fā)現(xiàn)有被細(xì)菌、真菌，甚至是支原體污染的情況出現(xiàn)。

因此，要定期對液氮罐進(jìn)行清潔。

可在補(bǔ)充液氮前，對液氮罐進(jìn)行清潔。

具體做法如下：

1.將凍存的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至另一潔凈的液氮罐中（盡量將所有配套器材全部更換為潔凈的，包括提籃和凍存盒）。

2.將待清潔的液氮罐中的液體倒出，靜置1-2天，待溫度恢復(fù)至0℃以上。

3.用常溫水沖洗，此時(shí)個(gè)別融化物質(zhì)粘在內(nèi)膽上，應(yīng)盡量全部洗刷干凈（同時(shí)對液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理）。

4.再用中性洗滌劑輕柔擦拭液氮罐內(nèi)壁和罐口部位，用水沖洗干凈（同時(shí)對液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理）。

5.建議最后再用MB Mycoplasma-off™支原體祛除噴霧劑（即用型），對液氮罐內(nèi)壁進(jìn)行噴灑或擦拭（同時(shí)對液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理）。干燥后，倒入液氮，將細(xì)胞裝入凍存盒，放進(jìn)液氮罐中即可。

Mycoplasma-off™支原體祛除噴霧劑，堪稱“污染祛除的萬金油"，含有支原體專用殺除劑Mynox®，可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。不僅對支原體起作用，還能有效祛除細(xì)菌、真菌等。并且成分安全，無腐蝕性和致癌性。