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定位于活神經元的細胞外表層膜,Ausbian胎牛血清助力細胞學研究

閱讀:568      發布時間:2023-8-13
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細胞學研究經常會添加胎牛血清,為細胞提供合適的營養成分。Ausbian進口胎牛血清,內毒素含量低,多批次平行供應,全程冷鏈運輸。

 

多細胞生物系統顯示出高度復雜的結構和組織特性,這對尋求在不引起損傷的情況下,實現細胞特異性生物界面的研究人員提出了挑戰。

 

例如,人類大腦包含約860億個神經元和超過100萬億個突觸連接,這些突觸連接對神經元之間的交流很重要,但是盡管幾十年來人們一直在努力將生物電子設備縮小到納米級,并擴大制造工藝,但目前,為大腦設計的設備通常一次只能與數百個細胞接口,并且無法實現細胞類型特異性與組織的整合。解決這一問題的另一種方法是,在完整的生物系統中對特定細胞進行遺傳編程,以原位構建具有所需形式和功能的人工結構。

 

之前的研究表明,導電聚合物可以通過電化學聚合直接在活組織的細胞上合成,也可以在具有天然氧化環境或氧化酶的生物體和組織中合成。然而,這些方法都無法實現細胞特異性的關鍵目標。已有的研究顯示,科學家們推出了基因靶向化學組裝(GTCA)方法,該方法使用細胞特異性遺傳信息來引導神經元啟動具有各種導電特性的聚合物材料的原位沉積。具體來說,抗壞血酸過氧化物酶Apex2作為催化劑在神經元中表達,并用于引發過氧化氫(H2O2)激活的導電聚合物或絕緣聚合物的氧化聚合。電生理和行為分析證實,功能聚合物的基因靶向組裝重塑了膜的特性,而不需要使用轉基因動物系,并成功地調節了自由移動動物的細胞類型特異性行為。

 

盡管取得了初步成功,但之前用于概念驗證系統的程序顯示出一個主要限制:Apex2不是單獨針對質膜的細胞外側,而且大部分Apex2保留在細胞內。開發一種可以有效地將反應中心放置在細胞外空間的工藝,在膜的外側,對于創造這種生物制造平臺的進一步應用至關重要,原因如下。

 

首先,具有完整細胞膜的活細胞通常不會滲透到大的前體或材料中;因此,酶的膜顯示不足可能導致生命系統中化學組裝的低產量。

 

其次,增加催化反應的酶的數量(利用細胞外空間)可以降低設定反應條件的重要試劑(H2O2)的濃度,從而提高生物相容性。

 

第三,細胞外空間的局部反應可能限制對細胞內天然化學的不利影響;先前的報道表明,某些細胞內聚合反應可能對細胞有毒,并可誘導細胞凋亡。

 

最后,除了膜定位之外,還存在許多其他的方法來推進技術的發展;例如,Apex2沒有針對細胞表面的應用程序進行優化。另一種表征良好的過氧化物酶,辣根過氧化物酶(HRP),催化與Apex2相同的反應,具有更快的動力學和更強的抗h2o2誘導的失活能力。

 

近日,一項發表在《Science Advances》上,標題為:“Genetically targeted chemical assembly of polymers specifically localized extracellularly to surface membranes of living neurons"。

 

科學家們提出了下一代GTCA,用于靶向聚合物組裝,HRP高度定位于初級神經元的質膜上,細胞內保留最小。通過這種方法在細胞外合成的聚合物在感興趣的活神經元膜周圍形成密集的簇,并且神經元在急性聚合后仍能存活。最后,這種膜定位方法被證明很容易適用于錨定其他蛋白質,從而可以探索多種替代的GTCA策略。


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