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有哪些微生物會污染培養的細胞?

時間:2023-8-18 閱讀:1573
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由于體外培養的細胞自身沒有抵抗污染的能力,而在培養基中加抗生素的抗污染能力也是有限的,一般在細胞受到污染早期或污染較輕時,能及時處理并除去污染物,部分細胞還有可能得到挽救。

通常情況下,會有哪些微生物會污染培養的細胞?

一、霉菌污染

污染的多是曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。霉菌污染后多數在培養液中形成淡黃色或是白色的漂浮物,一般肉眼可見,較易被發現,短期內培養液多不變混濁。
倒置顯微鏡下可以看見細胞之間有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲,并漂浮在培養液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散在細胞上及細胞周邊生長。

二、酵母菌污染

酵母到處存在,并能在合適的環境中快速生長。酵母污染很容易觀察到,培養物變渾濁,尤其在后期。一般PH值變化很小,嚴重時,PH值升高。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒,有些會長出較小顆粒。

三、耐藥細菌污染

細菌污染較常見的有大腸桿菌,白色葡萄球菌,假單孢菌等。加用抗菌素的培養液可預防和排除個別一般少量細菌的污染。一旦發生細菌污染很容易發現,多數情況下培養液短時間內變黃,表明有大量酸性物質產生,出現明顯渾濁現象;有時靜置的培養液起初不混,但稍加震蕩,就有許多混濁物漂起。

倒置顯微鏡下觀察,有時在細胞表面及周圍有大量細菌存在,細胞停止生長并有中毒表現,必要時可取少量培養液涂片染色檢查以明確細菌種類。

四、支原體污染

支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(小直徑0.2um)并獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性,可為圓形、絲狀或梨形。

支原體形態多變,在光鏡下不易看清內部結構。多數支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6-8.0),對酸耐受性差。對熱比較敏感,對一般抗生素不敏感。

支原體污染細胞后,培養液可不發生混濁。多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著,細微變化也可由于傳代、換液而緩解,因此易被忽視。但個別嚴重者,可致細胞增殖緩慢,甚至從培養器皿脫落。

為確定有無支原體污染可做如下檢測:熒光染色法支原體檢測、PCR法支原體檢測、qPCR支原體檢測、電鏡檢查。

五、黑膠蟲污染

黑膠蟲污染細胞后,細胞生長會變緩慢,與細胞共生,競爭營養,培養液可不發生混濁。細胞間隙內出現小黑點,會不斷變多,且對各類抗生素無效,顯微鏡下可以看到小黑點原地跳動,細胞狀態變化會因為傳代、換液而有所改善,因此易被忽視。但個別嚴重者,可致細胞空泡化,出現很多細胞碎片等。

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