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傳統(tǒng)流式、全光譜流式和質(zhì)譜流式有什么不同?

時(shí)間:2023-9-5 閱讀:2423
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流式最早的時(shí)候是從流體力學(xué)發(fā)展而來的。1738年, 瑞士物理學(xué)家、數(shù)學(xué)家丹尼爾·伯努利出版了《流體動(dòng)力學(xué)》。證實(shí)了流體在重力場中流動(dòng)時(shí)能量守恒的原理。這個(gè)原理就是后來廣泛被用于在流式細(xì)胞儀上實(shí)現(xiàn)高速單細(xì)胞液流的基本原理。并在隨后的兩百年時(shí)間里不斷的演變發(fā)展。那么你知道傳統(tǒng)流式、全光譜流式和質(zhì)譜流式有什么不同嗎?讓我們一起來看看吧!

一、傳統(tǒng)流式

傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀主要由四部分組成。

分別是流動(dòng)室和液流系統(tǒng);激光源和光學(xué)系統(tǒng);光電管和檢測系統(tǒng);計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)。

基本外觀如下:

圖片1.png

內(nèi)部結(jié)構(gòu)圖大致如下:

二、質(zhì)譜流式

質(zhì)譜技術(shù)早在1906年,J.JThomson在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)帶電荷的離子在電磁場中的運(yùn)動(dòng)軌跡與它的質(zhì)荷比有關(guān)。并于1912年制造出第一臺(tái)質(zhì)譜儀。質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)是在傳統(tǒng)流式和質(zhì)譜技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,它結(jié)合了流式技術(shù)和質(zhì)譜技術(shù),利用質(zhì)譜原理對單細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)檢測的流式技術(shù)。國內(nèi)出現(xiàn)了辰安、譜育等質(zhì)譜流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠家。質(zhì)譜流式細(xì)胞儀有別于傳統(tǒng)流式技術(shù)的基于熒光素進(jìn)行抗體標(biāo)記,它采用的是用金屬標(biāo)簽抗體標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)入質(zhì)譜流式細(xì)胞儀。逐個(gè)通過ICP質(zhì)譜檢測裝置,然后標(biāo)記好的細(xì)胞就被分離成單個(gè)細(xì)胞并依次進(jìn)入等離子體炬進(jìn)行離子化。然后被送入飛行時(shí)間質(zhì)譜。最后對每個(gè)細(xì)胞中各種金屬標(biāo)簽進(jìn)行定量檢測。進(jìn)而得知每個(gè)細(xì)胞中各目標(biāo)蛋白的含量。由于通過每個(gè)離心飛行時(shí)間來統(tǒng)計(jì)的,跟光譜流式分析wan全不一樣,這就不用進(jìn)行熒光補(bǔ)償了。

三、全光譜流式

全光譜流式跟傳統(tǒng)的流式是比較像的,包括儀器的結(jié)構(gòu)、檢測原理、所使用的熒光染料等原料基本上都一樣。wei一不同的就是,傳統(tǒng)流式是實(shí)時(shí)反應(yīng)測試結(jié)果的,由于各濾光片有濾光誤差,多種熒光染料同時(shí)檢測時(shí)會(huì)導(dǎo)致很多熒光遺漏或增加,這樣就需要調(diào)補(bǔ)償。而全光譜流式是事項(xiàng)每個(gè)染料上機(jī)一次,形成標(biāo)準(zhǔn),儀器會(huì)自動(dòng)把所有的染料對應(yīng)的熒光光譜組合成一個(gè)方案。后面多種染料同時(shí)上機(jī)檢測時(shí),儀器通過染料的波形去方案庫里尋找對應(yīng)的方案,然后再把這個(gè)方案預(yù)先儲(chǔ)存的波形調(diào)用出來顯示出來。

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