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細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染的原理
哺乳動物細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達(dá)高活性蛋白而被廣泛應(yīng)用。那么細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染的原理是什么？讓我們一起來看看吧！
哺乳動物細(xì)胞自身具有蛋白折疊和翻譯后修飾的功能，獲得的蛋白更具有天然活性。哺乳動物細(xì)胞生產(chǎn)蛋白的方式有兩種：瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時轉(zhuǎn)染的特點(diǎn)是短期快速表達(dá)，滿足蛋白的小量制備。而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染通過構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系能夠滿足蛋白的大量、長期生產(chǎn)。
瞬時轉(zhuǎn)染的原理是指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導(dǎo)入到哺乳動物細(xì)胞內(nèi)，該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。隨著細(xì)胞的生長分裂，外源基因會逐漸丟失。質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)能夠存在3-4天，此時間內(nèi)，質(zhì)粒外源基因在細(xì)胞內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)錄翻譯，得到極為少量的蛋白。這一整個快速轉(zhuǎn)染得到蛋白的過程就稱為瞬時轉(zhuǎn)染表達(dá)。
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