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公元1606年《本草綱目》首先傳入日本，1647年波蘭人彌格來中國，將《本草綱目》譯成拉丁文流傳歐洲，后來又先后譯成日、朝、法、德、英、俄等文字。

在這部書中，李時珍指出了許多藥物的真正效用，如常山可治瘧疾，延胡索能夠止痛。他還舉了日常生活中容易中毒的例子，象用錫做盛酒器，因有毒素能溶解在酒中，久而久之，會使飲酒的人慢性中毒。他在寫作中遇到難題時還跑到實地進行觀察。如看到舊本草中所說，穿山甲吞食螞蟻是通過鱗甲來誘捕。他覺得奇怪，認為百聞不如一見，他搞到一只活的穿山甲，仔細觀察了它的生活規律后，發現它是用舌頭吃螞蟻。他又解剖了穿山甲的胃囊，發現里面競有螞蟻一升之多，于是寫下了這段記載。

李時珍就這樣認真刻苦，一絲不茍地寫下了他的巨著《本草綱目》。由于他在書中批判了水銀“無毒”，久服“成仙”“長生”等說法，當時皇帝大臣都信道士們的水銀煉丹，所以這部著作大書商們都不敢出版，直到他死后于公元1596年才與讀者見面。出版后立即引起了巨大的反響，人們到處傳播它，并進行翻刻，成為醫生們的*書籍。從17世紀起，《本草綱目》陸續被譯成日、德、英、法、俄等五國文字。1953年出版的《中華人民共和國藥典》，共收集531種現代藥物和制劑；其中采取《本草綱目》中的藥物和制劑就有100種以上。

英國生物學家 達爾文稱《本草綱目》為“1596年的百科全書”！

 2011年5月，金陵版《本草綱目》入選世界記憶名錄。