CCK-8法檢測不同濃度化合物對細胞增殖活性影響

實驗儀器與試劑

表格一：實驗儀器

表格二：試劑

一、         實驗步驟

1、細胞消化、計數、配制成濃度為5×10⁴個/mL 的細胞懸液，96孔細胞培養板中每孔加入100μL 細胞懸液（每孔5×10³個細胞）；

2、  將細胞培養板置于37℃，5%CO₂ 培養箱中培養過夜；

3、  使用*培養液（90%培養液+10%胎牛血清）分別配置含不同濃度化合物的工作液，混合均勻；

4、  每孔加入100μL相應工作液，每種濃度設置3重復；

5、  細胞在37℃、5%CO₂培養箱中培養24h后棄上清液，新鮮培養液洗滌每孔細胞1次；

6、  將96孔板進行CCK-8染色，λ=450nm，測定OD值：

1)     每孔加入100μL CCK-8工作液（V_培養液： V _CCK-8原液 =10：1），在培養箱中繼續培養2小時；

2)     λ=450nm，酶標儀讀出每孔的OD 值，計算細胞增值率。

7、  計算各組細胞增值率