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ReadyAMP®在血液中應(yīng)用
PCR直接擴(kuò)增也叫直接PCR或者直擴(kuò),是一種不需要對(duì)樣本進(jìn)行任何處理,且直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增的手段。它能夠?qū)?xì)胞、細(xì)菌、植物等原始樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增。該方法最早應(yīng)用于動(dòng)植物檢測(cè)領(lǐng)域,主要用來研究基因分型、轉(zhuǎn)基因水平、基因敲除、DNA來源鑒定、STR分析等領(lǐng)域。和傳統(tǒng)PCR擴(kuò)增相比較,其優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在以下多個(gè)方面:
1、樣本用量小
2、操作簡(jiǎn)單
3、可高通量操作
4、無需精密設(shè)備
1、適合田邊/野外檢測(cè)
所以采用ReadyAMP®直接PCR擴(kuò)增血液樣本有如下優(yōu)勢(shì)。整個(gè)操作簡(jiǎn)單易懂,見下圖。
1、采血量小;
2、結(jié)果快速,可實(shí)現(xiàn)大量樣本同時(shí)操作;
3、簡(jiǎn)化流程、操作簡(jiǎn)單;
4、不使用有毒有害物質(zhì),對(duì)操作人員和環(huán)境均友好;
5、即適用于新鮮樣本,也適用于長(zhǎng)期保存樣本。
操作流程
案例A EDTA抗凝血擴(kuò)增16對(duì)引物
新鮮EDTA抗凝血為模板,使用ReadyAMP®血液PCR直接擴(kuò)增試劑盒(貨號(hào)Nu-BL01)中Blood PCR Premix擴(kuò)增16對(duì)引物。
案例B EDTA抗凝血擴(kuò)增不同豐度基因
新鮮EDTA抗凝血為模板,使用ReadyAMP®血液PCR直接擴(kuò)增試劑盒(貨號(hào)Nu-BL01)擴(kuò)增低豐度基因(IL-6、IFNg、INFb)和高豐度基因(Actin、18s、GAPDH)。
案例C EDTA抗凝血擴(kuò)增不同長(zhǎng)度基因
新鮮EDTA抗凝血為模板,使用ReadyAMP®血液PCR直接擴(kuò)增試劑盒(貨號(hào)Nu-BL01)擴(kuò)增不同長(zhǎng)度基因(0.5kb、1kb、2kb、3kb、4kb)。
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