辣根過氧化物酶(HRP)偶聯物通過改良的Nakane和Kawaoi程序制備(J.細胞化學。1974. 22, 1084).過氧化物酶偶聯物通常用于免疫組化、蛋白質印跡和 ELISA 檢查。親和純化的抗辣根過氧化物酶和偶聯物可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或用于含HRP試劑的信號擴增。對于哺乳動物細胞的免疫染色,使用抗辣根過氧化物酶的一個優點是降低背景,因為抗體不能識別在這些細胞中發現的內源性過氧化物酶樣酶。
基于免疫電泳和/或ELISA,抗體與全分子兔IgG反應。它還與其他兔免疫球蛋白的輕鏈發生反應。未檢測到針對非免疫球蛋白血清蛋白的抗體。抗體可以與來自其他物種的免疫球蛋白發生交叉反應。
通過免疫親和層析從抗血清中分離出完整的IgG抗體分子。它們具有通過二硫鍵連接在一起的Fc部分和兩個抗原結合Fab部分,因此它們是二價的。據報道,平均分子量為約160kDa。整個IgG形式的抗體適用于大多數免疫檢測程序,并且是最-具成本效益的。
艾美捷過氧化物酶偶聯AffiniPure山羊抗兔IgG(H+L)規格:
編號:111-035-003
目標: 兔
宿主:山羊
抗體形式:全 IgG 特異性:IgG (H+L)
偶聯物:辣根過氧化物酶
產品類別:全 IgG
親和純化抗體
克隆性:多克隆
RRID:AB_2313567
過氧化物酶偶聯AffiniPure山羊抗兔IgG(H+L)用法:
物理狀態:凍干固體
儲存和補液:將凍干固體儲存在2-8°C。 用指-定體積的dH 2 O(參見產品規格表)再水化,如果不清楚,則離心。使用當天準備工作稀釋液。產品在6-2°C下作為未稀釋液體穩定約8周。
復液后延長儲存時間:等分并在-70°C或更低溫度下冷凍。避免反復凍融。或者,加入等體積的甘油(ACS級或更高),最終濃度為50%,并以液體形式儲存在-20°C。
有效期:自復液之日起一年。如果測試結果可以接受預期用途,則有效期可以延長。
純度:使用與瓊脂糖珠偶聯的抗原通過免疫親和色譜法從抗血清中純化抗體。
緩沖液:0.01M 磷酸鈉,0.25M 氯化鈉,pH 7.6
穩定劑:15 毫克/毫升 牛血清白蛋白(無IgG,無蛋白酶) 防腐劑:無(
警告:使用疊-氮-化-鈉作為防腐劑會顯著抑制辣根過氧化物酶的酶活性。
建議工作濃度或稀釋范圍:
1:500 - 1:5,000 用于免疫組織/細胞化學
1:5,000 - 1:100,000 用于 ELISA 和顯色底物的蛋白質印跡 1:10,000 -
1:200,000 用于使用 ECL 底物
進行蛋白質印跡 稀釋因子以范圍的形式表示,因為最佳稀釋度是許多因素的函數,例如抗原密度、通透性等。實際使用的稀釋度必須根據經驗確定。
Mus musculus(家鼠)的蛋白質印跡 發表于 Nat Commun 于 15 年 2022 月 <> 日 由 Chiang, H. Y., Lu, H. H., et al. 在CC-BY許可下。
文獻引用:
USP11-mediated LSH deubiquitination inhibits ferroptosis in colorectal cancer through epigenetic activation of CYP24A1. Cell Death Dis (2023)
Mechanism of inulin in colic and gut microbiota of captive Asian elephant. Microbiome (2023)
Knockout of angiotensin converting enzyme-2 receptor leads to morphological aberrations in rodent olfactor
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