雌二醇（E2）是一種類固醇激素，屬于雌激素，也是主要的女性性激素。它以及在調節發情和月經女性生殖周期方面起著重要作用。雌二醇在青春期、成年期和妊娠期間對于女性生殖組織（如乳房、子宮和陰道）的發育和維持至關重要，但它也對許多其他組織產生重要影響，包括骨骼、脂肪、皮膚、肝臟和大腦。雖然男性的雌激素水平較女性低，但雌激素在男性中也有重要功能。它存在于大多數脊椎動物、甲殼動物、昆蟲、魚類和其他動物物種中。該試劑盒采用競爭性抑制酶免疫測定技術。所提供的微孔板已經預包被了特異性抗雌二醇抗體。標準品或樣品與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯的雌二醇一起加入到微孔板的孔中。競爭性抑制反應在HRP標記的雌二醇與未標記的雌二醇與抗體之間展開。將底物溶液加入到孔中，顏色的發展與樣品中雌二醇的含量相反。停止顏色的發展并測量顏色的強度。

艾美捷EZElisa雌二醇ELISA試劑盒基本參數：

目錄號：D-AEK0003

規格：48T/96T

儲存：在4°C下儲存12個月，避光。

檢測范圍：40 pg/mL-1,000 pg/mL

靈敏度：40 pg/mL

精密度：內部試驗精密度：變異系數（CV）＜15%。間接試驗精密度：變異系數（CV）＜15%

恢復率：恢復率范圍為85%至115%，總體平均恢復率為100%

特異性：EZElisa™雌二醇（E2）ELISA試劑盒對雌二醇的檢測具有高靈敏度和優異的特異性。未觀察到雌二醇與類似物之間的顯著交叉反應或干擾。

適用樣品：血清、血漿

供應材料和儲存條件：

Note: Std1: 0 pg/mL; Std2: 40 pg/mL; Std3: 100 pg/mL; Std4: 200 pg/mL; Std5: 400 pg/mL; Std6；1,000 pg/mL.

EZElisa雌二醇ELISA試劑盒試劑準備：

注意：使用前將所有試劑平衡至室溫。按照微孔板讀數儀的說明進行設置，并在測量光密度之前預熱15分鐘。

1×洗滌緩沖液：將洗滌緩沖液（20×）用去離子水稀釋1:20，得到1×洗滌緩沖液。儲存在4°C。如果洗滌緩沖液濃縮物中形成了結晶，請輕輕加熱至完-全溶解。儲存在室溫下。請注意，1×洗滌緩沖液穩定期為30天。

工作溶液：根據辣根過氧化物酶偶聯的雌二醇的體積取相應的檢測緩沖液1/10，并與辣根過氧化物酶偶聯的雌二醇混合，得到工作溶液，使用前進行混合。例如：取3 mL辣根過氧化物酶偶聯的雌二醇，加入0.3 mL檢測緩沖液，混合得到工作溶液。

EZElisa雌二醇ELISA試劑盒樣品制備：

1.血清：使用血清分離管，在室溫下凝固樣品30分鐘后，以1,000 g的速度離心15分鐘。立即使用血清進行檢測，或將樣品分裝并儲存在-20°C。避免反復凍融循環。

2.血漿：使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在采集后30分鐘內以1,000 g的速度離心15分鐘。立即進行檢測，或將樣品分裝并儲存在-20°C。避免反復凍融循環。

注意：不要使用明顯溶血或脂肪乳化的樣本。如果樣品將在24小時內使用，可以儲存在2到8°C。避免反復凍融循環。在進行檢測前，應將冷凍樣品緩慢恢復至室溫，并輕輕混勻。

程序分析：

1. 從微孔板架上取下多余的微孔板條，將它們放回包含干燥劑包的鋁箔袋中，并重新密封。

2. 每個孔中加入50 μL標準品或樣品。建議將所有標準品和樣品都復制加入微孔板中。設置一個空白孔，不加入任何溶液。

3. 向每個孔中加入50 μL工作溶液（空白孔除外），充分混勻，用提供的孔蓋蓋好，然后在37°C下孵育1小時。

4. 倒掉每個孔中的液體并進行洗滌，總共洗滌三次。使用多通道移液器或自動微孔板洗滌器，將每個孔填滿1×洗滌緩沖液（250 μL），靜置10秒鐘，每個步驟中完-全去除液體對良好的性能至關重要。在最后一次洗滌后，倒轉孔板并用干凈的紙巾輕輕拍干任何剩余的1×洗滌緩沖液。

5. 向每個孔中加入50 μL HRP底物A和50 μL HRP底物B，充分混勻，并用提供的孔蓋蓋好。在37°C下孵育15分鐘。將孔板放在黑暗中，遠離氣流和其他溫度波動。

6. 向每個孔中加入50 μL停止溶液。停止溶液應按照HRP底物的加入順序加入到孔板中。孔中的顏色應從藍色變為黃色。如果孔中的顏色是綠色，或者顏色變化不均勻，請輕輕敲擊孔板以確保充分混合。

7. 在30分鐘內使用設置為450 nm的微孔板讀數儀測定每個孔的光密度。

該試劑僅用于科學研究領域，不適用于臨床診斷或其他用途。