肌纖維是肌肉組織的組成部分,由肌細胞組成。根據其形態和功能特征,肌纖維可以分為平滑肌(也稱為非橫紋肌)、骨骼肌和心肌。有許多染色肌纖維的方法,例如Mallory的PTAH方法、Aniline Blue方法和磷鎢酸-血紅素(PTAH)方法。最初,當磷鎢酸-血紅素染色溶液被發明時,Mallory的PTAH方法包括各種磷鎢酸-血紅素方法。大約在1900年左右,Mallory將磷鎢酸溶液和血紅素染料結合在一起,發現這種組合對肌纖維有良好的染色效果。
如今廣泛使用的染色溶液是Mallory的磷鎢酸-血紅素染色溶液(PTAH自然氧化法)。血紅素可以通過PTAH方法進行化學氧化,但其保存時間較短,染色力容易降低。盡管自然氧化需要時間,但所得到的血紅素可以在兩年以上的時間內保持染色力,成為理想的染色溶液。它適用于中樞神經系統、一般組織結構以及使用標準固定劑固定的組織的染色。染色時間根據制備方法、使用的固定劑和所展示的組織結構而有所不同。
Mallory的磷鎢酸-血紅素染色溶液(PTAH化學氧化法)主要由PTAH氧化劑、草酸溶液和Mallory的PTAH染色溶液組成。Mallory的PTAH染色溶液是一種經過化學成熟的染料,在短時間內提供良好的染色力,不應長時間存儲。它常用于展示橫紋肌的橫紋和診斷橫紋肌肉瘤。橫紋肌肉瘤呈現出多樣的組織學變化,很難與未分化的間葉性腫瘤區分開來。通過使用磷鎢酸-血紅素染色,如果在腫瘤細胞的細胞質中發現藍色的橫紋,可以確認腫瘤具有橫紋肌分化。該染色試劑盒還可用于染色炎癥滲出物中的纖維素、DIC毛細血管中的纖維素和神經組織學。
艾美捷Mallory磷鎢酸蘇木素染色液相關參數:
Mallory磷鎢酸蘇木素染色液使用方法:
1. 將組織固定在10%福爾馬林固定劑中,并進行常規脫水和包埋。
2. 切割4μm厚的石蠟切片,并進行常規脫蠟至水。
3. 在新鮮配制的PTAH氧化劑中氧化5分鐘。
4. 用水簡單沖洗。
5. 在草酸溶液中漂白1-2分鐘。
6. 用自來水沖洗2分鐘,然后用蒸餾水沖洗。
7. 在Mallory的PTAH染色溶液(化學氧化法)中孵育24-48小時(覆蓋容器)。
8. 取出玻片,并迅速用95%乙醇洗去多余的染色溶液。
9. 進行常規脫水、透明化處理,并使用中性封片介質封片。
注意事項:
1. 如果橫紋的藍色不足或呈現明亮的紅色,說明氧化時間不足或可能過度氧化,需要更換或重新配制染色溶液。
2. 染色后不要用水沖洗Mallory的PTAH染色溶液。在用95%乙醇洗滌時,應迅速進行,因為長時間用水或乙醇洗滌會洗掉磷鎢酸-血紅素的染色。
3. Mallory的PTAH染色溶液是一種漸進染色,不要過度染色。染色24小時后,可以取出玻片,在顯微鏡下觀察染色程度。
4. 為了您的安全和健康,請在操作過程中穿實驗服和一次性手套。
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