糖皮質激素信號通路在發育、體液穩態、認知、免疫反應和代謝中發揮著重要作用。糖皮質激素是一類類固醇激素,可與糖皮質激素受體結合,導致其易位至細胞核。易位后,受體可以調節大量基因的轉錄,包括調節葡萄糖代謝和炎癥反應的基因。
糖皮質激素受體通路報告試劑盒旨在監測培養細胞中糖皮質激素信號通路的活性。該試劑盒包含糖皮質激素受體配體結合域的轉染就緒表達載體,該載體與 GAL4 的 DNA 結合域 (DBD) 融合 (GAL4 DBD-GR)。該融合構建體在多聚化 GAL4 上游激活序列 (UAS) 的控制下激活螢火蟲熒光素酶表達。這允許特異性檢測糖皮質激素誘導的糖皮質激素受體激活,而不需要單獨的轉錄靶標,并且與其他核受體途徑的交叉反應性較低。GAL4/UAS 報告基因與組成型表達海腎(海三色堇)熒光素酶載體預混合,
該試劑盒還包括與組成型表達海腎熒光素酶載體預混合的非誘導型螢火蟲熒光素酶載體作為陰性對照。非誘導型熒光素酶載體包含受最小啟動子控制的螢火蟲熒光素酶基因,但沒有任何額外的響應元件。陰性對照對于確定途徑特異性效應和背景熒光素酶活性至關重要。
艾美捷GAL4報告基因試劑盒(糖皮質激素受體途徑):
貨號:60522
英文名稱:GAL4 Reporter Kit (Glucocorticoid Receptor Pathway)
規格:500 rxns.
同義詞:糖皮質激素受體、GR、核受體亞家族 3 C 組成員 1、NR3C1、GAL4、GAL4/UAS、半乳糖凝集素、基于細胞的檢測試劑盒、基于細胞的檢測、報告基因檢測試劑盒
需要但未提供的材料:
• 哺乳動物細胞系和適當的細胞培養基
• 96 孔組織培養板或經過 96 孔組織培養處理的白色透明底檢測 板(Corning # 3610)
• 用于哺乳動物細胞系的轉染試劑
• Opti-MEM I 低血清培養基(Life Technologies #31985-062)
• 兩步熒光素酶測定系統:
兩步熒光素酶(螢火蟲和海腎)測定 (BPS Bioscience #60683):該系統直接在生長培養基中測定細胞。它可以與任何光度計一起使用。
不需要自動 注射器。
• 光度計
GAL4報告基因試劑盒(糖皮質激素受體途徑)組分:
GAL4報告基因試劑盒(糖皮質激素受體途徑)文獻參考:
Paguio A, et al. (2010) Improved Dual-Luciferase Reporter Assays for Nuclear Receptors. Curr Chem Genomics. 4: 43-49.
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