標簽蛋白質多泛素化水平檢測是一種強大的工具,用于評估細胞裂解液中目標蛋白質的多聚泛素化水平。該平臺基于捕獲板上的多聚泛素化蛋白質,然后使用抗體檢測感興趣的蛋白質(天然的或標記的),以量化蛋白質的多聚泛素化形式。檢測特定蛋白質響應外部刺激的泛素化狀態的變化是一個漫長而困難的過程,涉及免疫沉淀和隨后的蛋白質印跡分析。標簽蛋白質多泛素化水平檢測是 IP/WB 分析的快速、穩定且定量的替代方案。
注意:該試劑盒已經過優化和驗證,可用于評估標記蛋白的多聚泛素化水平。因此,最終用戶必須指-定表位標簽,以便接收適當的抗體進行檢測(myc、HA、FLAG® 、 V5、GST。不幸的是,His 6不能用于此測定)。
蛋白質泛素化是一種廣泛存在于細胞中的翻譯后修飾過程,通過共價結合泛素蛋白連接酶(E3)和泛素激活酶(E1)和泛素結合酶(E2)的協同作用,將泛素蛋白連接到特定的靶蛋白上。這一修飾過程在細胞內發揮著重要的調控作用,包括蛋白質降解、細胞信號傳導、細胞周期調控以及DNA修復等。
為了研究蛋白質泛素化在細胞調控中的作用,科學家們開發了多種方法來檢測和定量蛋白質的泛素化水平。其中,標簽蛋白質多泛素化水平檢測成為了研究人員廣泛應用的一種技術。該技術利用特定的抗體或結構域識別泛素化的靶蛋白,并通過免疫印跡、免疫組化或質譜等方法來檢測和定量泛素化水平。
標簽蛋白質多泛素化水平檢測的優勢在于其高靈敏度和特異性。通過選擇適當的抗體或結構域,可以針對特定的泛素化位點或鏈類型進行檢測。此外,該技術還可以通過Western blot等方法進行半定量或定量分析,從而提供關于泛素化水平的定量信息。
在研究中,標簽蛋白質多泛素化水平檢測已經被廣泛應用于多個領域。例如,在癌癥研究中,該技術被用于研究腫瘤相關蛋白的泛素化水平變化,以及泛素化在腫瘤發生和發展中的作用。此外,該技術還在神經退行性疾病、免疫調節和細胞應激等領域中發揮了重要作用。
艾美捷標簽蛋白質多泛素化水平檢測(LSS-UE103)的應用領域:
確定細胞處理導致的底物多聚泛素化水平的變化。
使用特異性結合目標蛋白質的抗體。
高通量、定量方法
標簽蛋白質多泛素化水平檢測相關研究:
PA950:PROTAC® 檢測板
PA770:PROTAC® 體外泛素化檢測試劑盒
UE101:UbiQuant™ 套件
總之,標簽蛋白質多泛素化水平檢測是一種有效的方法,可以揭示細胞調控中蛋白質泛素化的重要機制。
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