聚苯乙烯熒光微球在生物醫學領域有著越來越廣泛的應用,其中的一項重要應用是基于熒光微球的流式細胞分析技術,該技術可廣泛用于細胞分選,定量,免疫分析及快速診斷.該技術采用兩種粒子:熒光標準校正微球用于儀器的校正及定量研究,熒光編碼微球用于高通量免疫分析,而這兩種粒子都要求熒光強度高,精確定量染色,單分散性好。
艾美捷SPHERO 熒光微球 能夠攜帶許多熒光分子,較弱的刺激就可以引發較強的信號,所以只需要少量的低能輻射就能產生熒光信號,避免了使用傳統的放射性微球造成的輻射危險,并在不損失檢測靈敏度的前提下降低了成本。因此在眾多領域都具有廣泛的應用,如生物化學、生物醫藥、臨床醫學、基因分析以及光學儀器等,熒光微球在醫藥、生物方面的應用尤為重要。
Spherotech熒光微球包括SPHEROTM聚苯乙烯熒光微球、高熒光強度和低熒光強度的微球、熒光PMMA微球、多重熒光基團的微球和FITC標記的微球(可用于流式細胞儀的校準及不同的流式細胞數據的歸一化)。
Spherotech熒光微球的應用:
①在標記和示蹤方面的應用
通過在聚合物微球表面或內部引入一種或多種熒光物質制備的熒光微球,可應用到細胞標記、生物分子標記及在活性條件下的示蹤,也可固定蛋白質分子等,并跟蹤其功能化過程。
②在檢測方面的應用
將表面帶有能與被檢測物結合的配體的熒光微球與放射標記的被檢測物相混合,體系中能與微球結合的被檢測物,其放射能激發熒光物質產生熒光,而不能與微球結合的被檢測物,其放射能在水中淹滅,不能激發熒光,從而可以對被檢測物進行檢測。此外,熒光微球能夠攜帶許多熒光分子,較弱的刺激就可以引發較強的信號,所以只需要少量的低能輻射就能產生熒光信號,避免了使用傳統的放射性微球造成的輻射危險,并在不損失檢測靈敏度的前提下降低了成本。
③在免疫分析、藥物篩選方面的應用
1)熒光微球由于其可作為診斷試劑而應用于免疫分析。
熒光微球作為不同檢測對象的固定化載體應用于生物樣品檢測中,不同熒光微球對應不同的捕獲抗體,識別不同的抗原,從而實現多種待測抗原定性及定量檢測。
2)熒光微球表面連接可與待測物結合的受體,將待測物(配體)進行放射性同位素標記,兩者混合后,能與微球結合的待測物的放射性能激發熒光物質產生熒光,而不能與微球結合的待測物,由于距離微球較遠,則不能激發熒光物質產生熒光,從而達到了篩選的目的。高通量藥物篩選(HTS)是使用機器人和自動化系統,從大量的樣本中鑒別出對確定的分子靶標有相互作用的少量活性化合物的一種現代藥物篩選技術。熒光微球的發展促進了HTS的開發與發展。
④在固定化酶,基因研究方面的應用
1)酶可以通過物理吸附或化學鍵合方式固定在熒光微球上,由于酶的立體形態被固定,使其不但具有較高的pH穩定性、熱穩定性和貯存穩定性,而且易與反應物分離,可以重復使用,提高使用效率。因此,在微球載體上固定化酶或其它生物活性物質, 更有利于其功能的發揮。
2)納米級熒光微球的尺寸與生物分子如核苷酸、蛋白質等尺度相當,表面連接或包埋大量熒光分子聚合物。將此類微球連接在核苷酸鏈上,便可替代傳統芯片雜交熒光標記技術,實現熒光信號的放大,從而大大降低了基因芯片的成本。
⑤在標準物和生物探針方面的應用
1)熒光微球在細胞流式記數測定方面有很重要的應用 ,如用做測定的標準物以及用來校準細胞流式記數儀。
2)制備含有Cd Te量子點的聚苯乙烯微球,其表面吸附兔的免疫球蛋白后,可以作為蛋白質靈敏檢測探針,且這種生物功能性標記的量子點微球具有簡單、快速和實用性強等優點。
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