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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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Advanced BioMatrix丨HyStem巰基改性透明質(zhì)酸使用說明

時(shí)間:2024/2/19閱讀:139
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HyStem巰基改性透明質(zhì)酸基于交聯(lián)巰基修飾透明質(zhì)酸技術(shù)。透明質(zhì)酸是存在于結(jié)締組織、上皮組織和神經(jīng)組織的胞外基質(zhì)中的天然成分。通過HyStem®,研究人員可以創(chuàng)建可定制的3D水凝膠,用于培養(yǎng)細(xì)胞,其自然環(huán)境富含透明質(zhì)酸。HyStem®水凝膠套裝包括:- Glycosil®(巰基修飾透明質(zhì)酸)- Extralink®-LitePEGDA,聚乙二醇丙烯酸二丙烯酯)重組緩沖液(PBSHyStem®套裝組分混合后形成透明水凝膠。除了重組緩沖液外,其余組分均以凍干固體包裝,被氮?dú)獍⒃谳p微真空下長期儲(chǔ)存。

 

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艾美捷HyStem巰基改性透明質(zhì)酸ABM-GS310F細(xì)胞附著

HyStem®水凝膠系統(tǒng)提供了一種可變剛度的粘彈性基質(zhì),支持干細(xì)胞的擴(kuò)張(迄今已測(cè)試了人類胚胎干細(xì)胞、CD34+和肝細(xì)胞前體細(xì)胞)。HyStem®水凝膠不支持表面細(xì)胞附著。細(xì)胞必須被封裝在水凝膠內(nèi)。細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)蛋白或肽可以與Glycosil在交聯(lián)之前混合,以提供附著信號(hào),并允許細(xì)胞附著在水凝膠表面。然而,添加的ECM蛋白類型取決于細(xì)胞類型和期望的結(jié)果(擴(kuò)張而無分化或伴隨分化)。

 

儲(chǔ)存Glycosil:儲(chǔ)存在-20°C,可保存一年。重組溶液必須在同一天使用,不能重新冷凍。Extralink-Lite:儲(chǔ)存在-20°C,可保存一年。重組溶液可在-20°C保存一個(gè)月。重組緩沖液:儲(chǔ)存在4°C或室溫,可保存一年。

 

HyStem巰基改性透明質(zhì)酸使用說明

GlycosilExtralink-Lite溶液通過用重組緩沖液溶解凍干固體來準(zhǔn)備。重組后,GlycosilExtralink-Lite將在pH約為7.41X磷酸鹽緩沖液(PBS)中。按照說明重組后,套裝將能夠產(chǎn)生2.57.512.5毫升的材料以形成3D水凝膠。1)讓套裝組分室溫恢復(fù)1小時(shí)。2)使用注射器和針頭用重組緩沖液重組套裝組分。如果在重組過程中移除瓶塞,請(qǐng)盡量減少暴露在氧氣中,以避免潛在的自交聯(lián)。3)在加入重組緩沖液后,立即將每個(gè)小瓶渦旋幾秒鐘。將小瓶水平放置在搖床或搖床上。每隔15分鐘快速渦旋樣品。有些組分可能需要>2小時(shí)才能完-全溶解。加熱至37°C并輕輕渦旋將加速溶解。組分將變清澈且略帶黏稠。4)將Extralink-Lite1:4的體積比例加入到Glycosil中形成3D水凝膠。1. - 對(duì)于2.5毫升和7.5毫升套裝:0.25毫升Extralink-Lite1.0毫升Glycosil,對(duì)于2.5毫升和7.5毫升套裝對(duì)于12.5毫升套裝:2.5毫升Extralink-Lite10.0毫升Glycosil2. 用移液器混合。3. 如果封裝細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)诩尤?span style="font-family: Calibri;">Extralink-Lite之前將細(xì)胞沉淀重懸于Glycosil溶液中。來回移液以混合。4. 將所有組分混合后,等待5分鐘,然后再次用移液器混合以確保細(xì)胞均勻分布。5)將HyStem注入所需的培養(yǎng)皿。凝膠化將在約15分鐘內(nèi)開始,完-全凝膠化將在約90分鐘內(nèi)發(fā)生。


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