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熒光F-CHP--表現出色的熒光成像工具

時間:2024/3/14閱讀:159
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膠原雜交肽(CHP)是一種新穎的多肽,在體外和體內都能特異性地結合未折疊的膠原鏈。[1,2,3]通過共享天然膠原的Gly-X-Y重復序列,CHP具有通過改造三螺旋結構與變性膠原鏈雜交的強大能力以類似于DNA片段退火成互補DNA鏈的方式。chp是非常特異的:由于缺乏結合位點,它對完整的膠原分子的親和力可以忽略不計,并且由于其中性和親水性,它對非特異性結合是惰性的。

 

CHP是一種強大的組織病理學工具,可以直接檢測多種疾病引起的炎癥和組織損傷,以及在發育和豪老過程中的組織重塑。[3]CHP在三維膠原培養中有力地顯示了癌細胞蛋白水解酶遷移引起的細胞周圍基質轉換,不使用合成的含氟基質或轉基因細胞。[4]CHP可以在分子水平上測量和定位膠原組織的機械損傷。[5]它還可以評估去細胞外基質中的膠原變性。[6]此外,CHP可用于SDS-PAGE凝膠中膠原條帶的特異性顯示,無需蛋白印跡。

 

熒光F-CHP是一種常用于生物標記和熒光成像的熒光染料。它具有優良的熒光性能,包括強熒光信號和良好的光穩定性,適用于多種生物學應用。熒光F-CHP的化學結構使其在蛋白質、核酸和其他生物分子的標記中表現出色。這種熒光染料在細胞和分子生物學研究中廣泛應用,可用于追蹤生物分子的位置、運動和相互作用。由于其出色的性能和多功能性,熒光F-CHP在生命科學領域中扮演著重要的角色,為研究人員提供了強大的工具來探索生物體系的復雜性。

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艾美捷熒光F-CHP直接在SDS-PAGE凝膠中可靠地測量I型膠原蛋白的稀釋系列,并檢測到含有少至5ng蛋白質的條帶()CHP可識別多種膠原類型(),由于其中性和親水性,對ECM()和細胞裂解液()中的非膠原分子沒有親和力。

 

用 Typhoon Imager 熒光成像記錄(λex: 488 nm). .

 

此外,CHP可用于替代不成功的膠原抗體或常規膠原染色檢測高度變性組織中的膠原蛋白[1]。 下圖顯示了完-全加熱的豬韌帶切片中完整的膠原含量,通過F-CHPB-CHP可見(進一步通過酶標NeutrAvidin檢測)CHP染色對膠原蛋白的特異性比傳統的膠原蛋白染色(Sirus Red)更高,后者依賴于膠原蛋白結合的正電荷,可以對其他堿性氨基酸含量高的蛋白質進行非特異性染色。

 

熒光F-CHP文獻參考:

[1]Targeting and mimicking collagens via triple helical peptide assemblies.Current Opinion in Chemical Biology,2013,17,968-975.

[2]In situ imaging of tissue remodeling with collagen hybridizing peptides.ACS Nano,2017,11,9825-9835.

[3]Targeting collagen strands by photo-triggered triple-helix hybridization.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2012,109,14767-14772.

[4]Visualizing collagen proteolysis by peptide hybridization:From 3D cell culture to in vivo imaging.Biomaterials,2018,183,67-76.

[5]Direct detection of collagenous proteins by fluorescently labeled collagen mimetic peptides.Bioconjugate Chemistry,2013,24,9-16.

[6]Molecular level detection and localization of mechanical damage in collagen enabled by collagen hybridizing peptides.Nature Communications,2017,8,14913,doi:10.1038/ncomms14913.

 


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