CellSafe-BioMycoX支原體PCR檢測試劑盒利用聚合酶鏈式反應（PCR），這是一種檢測細胞培養物和其他細胞培養物中支原體污染的Z高靈敏度選擇衍生生物制品。該引物組特異于支原體基因組。這允許檢測口腔分枝桿菌、豬鼻分枝桿菌、精氨酸分枝桿菌、發酵分枝桿菌、瘦骨精漿體萊德拉維，人型分枝桿菌，通常在細胞培養中作為污染物出現。此外，該試劑盒可以檢測M。肺炎支原體、唾液支原體、滑膜支原體和解脲原體種。真核生物和細菌DNA未擴增BioMycoX支原體PCR檢測試劑盒。

艾美捷CellSafe-BioMycoX支原體PCR檢測試劑盒（#D-25, D-50, D-100）特點：

篩選研發細胞培養中的支原體污染

高靈敏度檢測209種支原體

模板DNA：培養上清液煮沸或從培養細胞中提取基因組DNA

高靈敏度：10~100拷貝/反應

特異性：不檢測與支原體有密切親緣關系的其他細菌種類

UDG系統：防止交叉污染

CellSafe-BioMycoX支原體PCR檢測試劑盒靈敏度：

使用此試劑盒進行PCR的靈敏度為每個反應10到100份目標DNA拷貝。在實際培養樣本中檢測的靈敏度取決于樣本制備的質量。

預防交叉污染：

采取措施以Z小化從一個實驗到下一個實驗核酸的潛在交叉污染。使用不同的工作區和移液管進行模板制備和PCR設置步驟。

2X PCR主混合液中包含dUTP而非dTTP。當dUTP在PCR擴增中取代dTTP時，UNG處理（尿嘧啶-N-糖基化酶，HiSenseTM UDG熱敏感，產品編號.SCU-100，不在本試劑盒中提供）可以防止含有dU的PCR產物的后續再擴增。UNG通過水解dU含有的DNA位點上的尿嘧啶-糖苷鍵，作用于單鏈和雙鏈dU含有的DNA。通過這種策略，交叉污染被消除，而模板DNA（含有T的DNA）保持完整。

預防交叉污染的注意事項：

在處理試劑盒中包含的陽性對照DNA時可能會發生交叉污染。為了防止交叉污染，在PCR過程中處理陽性對照時使用不同的地點和移液管。確保使用試劑盒中包含的PCR級水，并在實驗期間佩戴手套。此外，使用過濾吸頭以防止氣溶膠。

CellSafe-BioMycoX支原體PCR檢測試劑盒凝膠電泳結果：

使用定量的M. arginini（精氨酸菌）基因組DNA進行測試

1. 100bp ladder

2. 104 copies

3. 103 copies

4. 102 copies

5. 101 copies

6. 1 copy

7. 陽性對照

8. 無模板對照

當存在支原體污染時，會出現大約250-300堿基對大小的條帶。大約700堿基對的內部控制DNA條帶表明PCR反應正常進行。

1) 建議通過添加1μl陽性對照DNA進行無模板對照反應和陽性對照反應。

2) 如果PCR反應受到高濃度的胎牛血清（FBS）抑制，使用基因組DNA作為模板可能會有幫助。

3) PCR抑制物質可能會在細胞培養基中積累（例如，雜交瘤細胞等）。在這種情況下，使用稀釋后的樣本或基因組DNA作為模板可能會有幫助。

4) 在嚴重的支原體污染情況下，內部控制DNA條帶可能不會出現。

CellSafe致力于提供支原體全面解決方案，可以有效檢測、消除和預防影響細胞培養的支原體。作為CellSafe在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的CellSafe產品。