TET家族的5mC羥化酶包括TET1、TET2和TET3。這些TET蛋白可能通過結合到富含CpG的區(qū)域來防止不必要的DNA甲基轉移酶活性，并通過羥化酶活性將5mC轉化為5hmC，進而轉化為5-羧基胞嘧啶（5-caC），從而促進DNA去甲基化。研究表明，基因組5hmC水平與TET羥化酶活性相關。此外，TET1在胚胎干細胞中通過結合不同靶基因顯示出轉錄激活和抑制的雙重功能。TET1也是急性髓性白血病中MLL基因的融合伴侶，被認為是一種癌蛋白。TET2在白血病中經常發(fā)生突變，被認為具有腫瘤抑制作用。TET3已被證明在哺乳動物合子中的DNA甲基化重編程過程中發(fā)揮d特作用。因此，在癌癥診斷和開發(fā)新的基于靶點的癌癥治療中，激活腫瘤抑制因子TET酶如TET2或抑制癌蛋白TET酶如TET1將是重要的。然而，目前檢測使用核提取物和純化酶的TET羥化酶活性/抑制的方法很少。為了解決這個問題，EpigenTek開發(fā)并提供了Epigenase™ 5mC羥化酶TET活性/抑制檢測試劑盒（比色法）。

5mC-羥化酶TET活性/抑制分析試劑盒用途：

適用于使用核提取物或從包括哺乳動物、植物、真菌和細菌等多種物種中純化的TET同種型（TET 1-3）來測量總5mC羥化酶TET酶的活性/抑制。這些樣本可以是培養(yǎng)細胞、新鮮和冷凍組織等多種形式，但不限于此。

艾美捷-5mC-羥化酶TET活性/抑制分析試劑盒（#P-3086）組分：

5mC-羥化酶TET活性/抑制分析試劑盒具有以下優(yōu)點和特性：

比色法檢測，步驟簡單易跟，方便快速。整個程序可在5小時內完成。

直接測量TET羥化酶活性，通過直接檢測TET轉化的羥甲基化產物。

創(chuàng)新的試劑盒組合使背景信號極低，使檢測簡單、準確、可靠和一致。

可以使用細胞/組織提取物和純化的TET蛋白，這允許檢測體內外TET羥化酶抑制劑的抑制效果。

新穎的檢測原理實現(xiàn)了高靈敏度。可以檢測低至20納克的純化TET1羥化酶的活性。

包含羥甲基化標準品，可以量化TET羥化酶的特異性活性。

條形微孔板格式使檢測靈活：手動或高通量分析（96個檢測）。

原理與操作流程：

在這個檢測中，一個甲基化的底物被穩(wěn)定地包被在微孔板孔中。活性的TET酶與底物結合，將甲基化底物轉化為羥甲基化產物。這些由TET轉化的羥甲基化產物可以被特定的抗體識別。羥甲基化產物的比率或數(shù)量，與酶活性成正比，可以通過在450納米波長的微孔板分光光度計上讀取吸光度來進行比色測量。TET酶的活性反過來與所測量的光密度強度成正比。

5mC-羥化酶TET活性/抑制分析試劑盒運輸與儲存：

試劑盒分三部分運輸：第一部分在常溫下運輸，第二和第三部分則在4°C的冰凍冰袋中運輸。收到后請按以下方法儲存：(1) 將TS、HC5、HC7、HC8、輔因子1、輔因子2和輔因子3存放在-20°C的避光環(huán)境中；(2) 將WB、HC6、DS和8孔檢測條存放在4°C的避光環(huán)境中；(3) 將其余組分（TAB、BS和SS）存放在常溫的避光環(huán)境中。

注意：使用前檢查WB 10X洗滌緩沖液是否含有鹽類沉淀物。如果有，將其在室溫或37°C下加熱并搖動緩沖液，直到鹽類重新溶解。

如果儲存得當，試劑盒的所有組分從發(fā)貨日期起穩(wěn)定有效期為6個月。

相關產品：

核提取物制備：

OP-0002-1 EpiQuik™ 核提取物提取試劑盒

DNA 羥甲基化：

P-1036 MethylFlash™ 羥甲基化DNA定量試劑盒（比色法）

P-1037 MethylFlash™ 羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）

P-1038 EpiQuik™ 羥甲基化DNA免疫沉淀（hMeDIP）試劑盒

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