GSK3α檢測試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗GSK3Α檢測試劑盒抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的GSK3Α檢測試劑盒與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GSK3Α檢測試劑盒抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素???span style="font-family: Calibri;">GSK3Α檢測試劑盒抗體與結合在包被抗體上的GSK3Α檢測試劑盒結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,GSK3Α檢測試劑盒濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中GSK3Α檢測試劑盒的濃度。
艾美捷GSK3α檢測試劑盒:
貨號:BPS-79698
同義詞:糖原合酶激酶3α,GSK-3α,絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶GSK3A
檢測試劑盒格式:發光型
物種:人類
未提供所需材料:
Kinase-Glo® Max檢測試劑(Promega #V6071)
二硫蘇糖醇(DTT,1 M;可選)
能夠讀取發光的微孔板閱讀器
可調節的微量移液器和無菌吸頭
30°C恒溫箱
UniProt編號 :#P49840
儲存/穩定性:按照推薦條件儲存,可保存長達6個月。
運輸溫度:-80°C
禁忌:保持最終DMSO濃度低于1%
警告:避免多次凍融循環。
免責聲明和限制:BPS Bioscience檢測試劑盒是根據我們特定的協議,使用列出的組分進行驗證的。任何對試劑盒組分或協議的偏差,如使用不同的蛋白質、細胞/組織裂解物或緩沖液(包括使用其他商業來源的相同組分),將使試劑盒的性能保證無效,并且不推薦使用。
科學類別:激酶
監管狀態:僅限研究使用
GSK3α檢測試劑盒格式:
*GSK3α的濃度具有批次特異性,將在含有酶的試管上顯示。
文獻參考:
McCubrey JA., et al. Oncotarget 5(10): 2881-2911 (2014)
GSK3α檢測試劑盒靈敏度、檢測范圍、特異性和重復性:
靈敏度:最小可測:0.227ng/mL
檢測范圍:0.625-40ng/mL
特異性:可檢測重組或天然的大鼠GSK3Α檢測試劑盒,且與其它相關蛋白無交叉反應。
重復性:板內,板間變異系數均<10%。
GSK3Α檢測試劑盒樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品最高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。
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