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SIN載體,抗CD 19 CAR慢病毒(CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z)方案

時間:2024/8/6閱讀:151
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CD19 CAR慢病毒是復制能力不強、基于HIVVSV-G假型慢病毒顆粒,已準備好轉導大多數哺乳動物細胞,包括原代細胞和非分裂細胞。這些病毒轉導與第二代CAR(嵌合抗原受體)連接的抗CD19(克隆FMC63)的ScFv部分,該部分含有CD8鉸鏈和跨膜結構域、4-1BBCD3ζ信號結構域。該構建體還包括抗CD19 CAR盒下游的IRES增強型綠色熒光蛋白(eGFP)序列,以促進轉導細胞的分析和分選(圖1)。

 

41.png



1。(A) 用于產生抗CD19 CAR慢病毒的慢病毒載體示意圖。該向量是SIN向量,它包含eGFP。(B) 構建顯示抗CD19 CAR成分的圖。

注:該產品轉導的抗CD19 CAR構建體(CD19 ScFv-CD8-4-1BB-CD3ζ)與其他可用的抗CD19CAR慢病毒(BPS Bioscience#786007860178602)相同,但在關鍵方面有所不同。該產品含有eGFP報告/選擇標記,因此可以根據eGFP表達對轉導的細胞進行分類。請參閱表1

 

艾美捷CD19 CAR慢病毒CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 zeGFP#BPS-78775

提供形式:50微升的抗CD19 CAR,滴度≥3×10^8 TU/ml。每批的滴度可能會有所不同;確切的數值會隨每次發貨提供。

配方這些慢病毒是從HEK293T細胞生產的,經過濃縮并重新懸浮在DMEM中。

儲存/穩定性慢病毒隨干冰發貨。長期儲存建議在-80°C下保存慢病毒,自收到之日起可保存長達12個月。避免重復凍融。每次凍融都可能導致滴度顯著下降。

培養基

T細胞培養基:TCellM™(BPS Bioscience #78753)補充了10 ng/ml的白介素-2BPS Bioscience #90184)。

實驗所需的培養基

解凍培養基3BPS Bioscience #60186):F-12K培養基(KaighnHam's F-12培養基的改良)補充了10% FBS1%青霉素/鏈霉素。

應用作為T細胞中抗CD19 CAR評估的陽性對照。

轉導優化實驗。

生成抗CD19 CAR-T細胞(僅限研究使用,不用于治療目的)。

運輸溫度:-80°C

 

CD 19 CAR慢病毒(CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN載體)相關產品:

Anti-CD19 CAR / NFAT (Luciferase) Reporter Jurkat Cell Line (CD19 SCFV-CD28-4-1BB-CD3ζ)

Anti-CD19 CAR-T Cells

Firefly Luciferase CD19 Knockout Raji Cell Line

CD19 Knockout Raji Cell Line

Firefly Luciferase CD19 Knockout NALM6 Cell Line

Human NK Cell Isolation Kit


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