PluriSelect-紅細胞(RBC)裂解緩沖液經過精心設計、配方制定和測試,以確保在單細胞懸浮液中對紅細胞進行Z佳裂解,同時對白細胞的影響Z小。有核紅細胞不能通過氯化銨有效裂解。這種1倍濃度的紅細胞裂解緩沖液已經準備好使用。
艾美捷PluriSelect-10倍紅細胞裂解緩沖液(100ml):
貨號 60-00051
規格 100 ml
感興趣的領域 細胞生物學
不育癥 無菌型
相位范圍 pH 7.4
運輸條件 Room Temperature
儲存條件 4-8 °C
規范性聲明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures
PluriSelect-10倍紅細胞裂解緩沖液組分:
氯化銨 (NH4 Cl) (1550毫摩爾/升)
碳酸氫鉀 (KHCO3) (100毫摩爾/升)
乙二胺四乙酸 (EDTA) (1毫摩爾/升)
PluriSelect-10倍紅細胞裂解緩沖液應用說明:
人外周血和骨髓紅細胞的裂解
1、將10倍紅細胞裂解緩沖液用去離子水稀釋至1倍工作濃度。使用前將1倍溶液預熱至室溫。
2、對于全血裂解,使用樣本體積20倍的1倍紅細胞裂解緩沖液體積,例如,向含有Z多100微升全血的管中加入2.0毫升的1倍紅細胞裂解緩沖液。
3、在加入裂解溶液后立即輕輕旋動每個管。在冰上或冰箱(4°C)中避光孵育10-15分鐘。
4、以350 x g離心10分鐘。丟棄上清液,不要攪動沉淀物。
5、在適當的緩沖液中重新懸浮沉淀物(例如PBS或洗滌緩沖液),洗滌1次。
6、重新懸浮并繼續進行進一步的程序。
小鼠脾臟紅細胞的裂解
1、收獲小鼠脾臟并準備單細胞懸浮液。
2、通過離心(350 x g)使細胞沉淀;吸去上清液。
3、將10倍紅細胞裂解緩沖液用去離子水稀釋至1倍工作濃度,并在5毫升1倍裂解緩沖液中重新懸浮沉淀物。
4、在冰上或冰箱(4°C)中孵育4-5分鐘,偶爾搖動。
5、通過向裂解緩沖液中加入20-30毫升1倍PBS來終止反應。
6、離心細胞(350 x g)并丟棄上清液。
7、在適當的緩沖液中重新懸浮沉淀物(例如PBS(目錄號)或洗滌緩沖液(目錄號)),洗滌1次。
8、計數細胞,調整密度,并繼續進行細胞分離或細胞染色程序。
艾美捷科技是pluriSelect的特約代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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