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CD40:CD40L TR-FRET檢測測定原理說明

時間:2024/8/13閱讀:133
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CD40是一種主要表達在B細胞、單核細胞、巨噬細胞和某些樹突細胞表面的共刺激分子。它通過與CD40配體(CD40L,也稱為CD154)結合,發揮其生物學功能,主要參與免疫應答的調節,特別是在T細胞依賴的B細胞激活和抗體產生過程中。

CD40-CD40L的相互作用是免疫系統中一個關鍵的信號通路,它促進B細胞的增殖、分化和存活,同時增強抗體的類別轉換。此外,CD40信號還參與樹突細胞和巨噬細胞的成熟過程,從而影響T細胞的激活和整個適應性免疫反應。

CD40在多種疾病的發病機制中扮演著角色,包括自身免疫疾病、炎癥性疾病和某些類型的癌癥。例如,在某些自身免疫疾病中,CD40信號的異常激活可能導致B細胞功能失調,進而產生自身抗體。

鑒于CD40在免疫調節中的核心作用,它已成為治療某些疾病的潛在靶點。通過靶向CD40或其配體的生物制劑,可以調節免疫反應,治療如風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡等自身免疫疾病。

 

CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒旨在測量CD40(分化簇40)與CD40LCD40配體)的結合活性,用于使用TR-FRET(時間分辨熒光共振能量轉移)進行篩選和分析應用。它使用鋱標記的供體和標記的受體來完成TR-FRET配對。CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒采用方便的384孔格式,含有足夠的重組生物素化CD40(氨基酸21-193)、重組CD40L(氨基酸116-261)、Tb標記的供體、染料標記的受體和用于384反應的檢測緩沖液。

21.png

1:CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒示意圖

將含有鋱標記供體、染料標記受體、CD40CD40L和抑制劑的樣品孵育90分鐘。然后使用熒光閱讀器測量熒光強度。在CD40CD40L結合的情況下,由于供體和受體的接近,會發生能量轉移。結合的破壞導致能量傳遞的減少。λ=665 nm處的熒光強度直接對應于CD40CD40L的結合。

 

艾美捷CD40:CD40L TR-FRET檢測

貨號:BPS-79258

同義詞:T細胞抗原Gp39,腫瘤壞死因子相關激活蛋白,TRAP,腫瘤壞死因子配體超家族成員5TNFSF5CD154CD40CD40分子

試劑盒格式:TR-FRET(時間分辨熒光共振能量轉移)

物種:人類

提供形式:該試劑盒以方便的384孔格式提供。

未提供的必需材料:

能夠測量時間分辨熒光共振能量轉移(TR-FRET)的熒光微孔板閱讀器

可調節的微量移液器和無菌吸頭

UniProt #CD40: P25942; CD40L: P29965

存儲/穩定性:如果按照指示存儲材料,該試劑盒在收到日期起的6個月內將表現最佳。

使用說明:詳見試劑盒數據表的詳細協議

應用:

研究酶動力學。

在高通量篩選(HTS)應用中篩選小分子抑制劑。

運輸溫度:-80°C

 

CD40:CD40L TR-FRET檢測文獻參考:

Annis A., et al., 2004 J. Amer. Chem. Soc. 126(4): 15495-15503.

Yan, T., et al., 2001 J. Cellular Biochem. 83(2): 320-325.

Tang T., et al., 2021 Pharmacol The 219:107709.

 

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