大鼠背根神經元原代細胞

大鼠背根神經元細胞分離自脊椎背根神經節；感覺神經母細胞發出軸突，呈束狀，左右對稱地從神經管的背部進入，此時的脊神經節即改稱為背根神經節。神經系統最基本的結構和功能單位是神經元，即神經細胞，其大小和外觀在中樞神經系統中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內含神經絲、微管、內質網、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起，能在神經元之間傳遞電沖動，突起的大小和形態各不相同，很難用常規的顯微鏡鑒別。脊髓背根神經節是周圍神經的主要傳入神經元，是感覺信號傳導的中繼站。背根神經元細胞的獲取較為困難，需要在盡可能短的時間內通過解剖顯微鏡獲得一定量的背根神經節組織。神經組織體外培養方法是當代神經科學一項很有價值的研究手段，背根神經節富含周圍神經系統感覺神經元，已廣泛用于軸突的導向及再生、中樞及周圍神經系統的髓鞘形成、神經營養因子作用及受體分布、神經細胞衰老機制、基因治療、組織工程等神經科學的研究。

產品名稱：大鼠背根神經元細胞

組織來源：脊髓組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 神經元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠背根神經元采用膠原酶-酶聯合消化法、神經元專用培養基培養篩選結合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠背根神經元經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

豬肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒

Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒

PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 豬內皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-銀環蛇毒素

血液賴(lysine)含量化學比色法定量試劑盒20次

NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)試劑盒規格：96T/48T

豚鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 ，英文名： MIF ELISA Kit

Human amyloid precursor protein (APP) ELISA Kit 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒

MonkeyIerleukin1,IL-1ELISAKit白介素1(IL-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBGP(Osteocalcin/BoneGla-protein)ELISAKit兔

細菌氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit兔子白介素9(IL-9)試劑盒規格：96T/48T

人粘蛋白1(MUC1)試劑盒   96T/48T   ELISA   組裝/原裝

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒   96T/48T

人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒   96T/48T

人早老素2(PS-2)試劑盒

NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細胞調亡素/死亡受體5抗原

PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標簽)

GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白

293來源病毒包裝細胞;ΦA 人上皮細胞 M-NFS-60 (小鼠白血病細胞G-CSF依賴性)     CD3E Others Human 人 CD3E 人細胞裂解液   人星形膠質細胞 Human  RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 豬原代主動脈平滑肌細胞 人原代海綿體平滑肌細胞

大鼠背根神經元原代細胞環腺苷二0酸核糖水解酶(cADPRH)重組蛋白 Recombinant Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH)

CES2 Protein Human 重組人 CES2 / Carboxylesterase-2 蛋白

IFNA14重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Canine 重組狗 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽)

DCUN1D1重組人 DCUN1D1 / SCCRO 蛋白 Protein