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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠表皮角化細胞先蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠表皮角化經PCNA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠表皮角化原代細胞 | 組織來源 | 皮膚組織 |
英文名稱 | Rat Epidermal Keratinized Cells | 貨號 | YS-01X7478 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠表皮角化細胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角化細胞（KC）是構成表皮的主要細胞成分，在體內處于不斷增殖過程中，分裂的角化細胞主要位于其基底層，少數位于棘細胞層。隨著向表層的推移，細胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品：
小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒
Human vacuolating cytotoxin associated protein A (VacA) ELISA Kit 人空泡毒素相關蛋白A(VacA)試劑盒
Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 人α2抗纖溶酶(α2-AP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(Mouseovariancancermarker-CA125)ELISAKit小鼠卵巢癌標志物CA125
飲料乙比色法定量試劑盒20次
MouseIerleukin9,IL-9ELISAKit小鼠白介素9(IL-9)試劑盒規格：96T/48T
魚糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒
Human ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)試劑盒
PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒 進口分裝
ADVIgG腺病毒IgG混合型(間接法二步法)
血液乙醇脫氫酶III活性比色法定量試劑盒20次
MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒
脂肪酸合成酶 英文名稱： Human Fatty Acid Syhase 規格： 英文縮寫： FASN
脂肪酸合成酶 英文名稱： Human Fatty Acid Syhase 規格： 英文縮寫： FASN
生長激素結合蛋白 英文名稱： GH-binding protein 規格： 英文縮寫： P
環0酸鳥苷 英文名稱： cyclic adenosine monophosphate 規格： 英文縮寫： cGMP
CDH1重組小鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型豬流感病毒H1N1-M2蛋白
USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 標簽) Protein
IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)
615小鼠網織細胞性白血病瘤株;L615 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S2 (aa 726-1296) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 豬原代胰腺導管上皮細胞 小鼠原代腸神經膠質細胞
大鼠表皮角化原代細胞PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase 0.5mgPERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 蛋白激酶R樣內質網激酶抗原
ADA Protein Human 重組人 ADA / Adenosine deaminase 蛋白 (His 標簽)
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
C Protein Human 重組人 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (His 標簽)
CLEC4A重組人 CLEC4A / CLECSF6 / DCIR 蛋白 (His 標簽) Protein
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