大鼠腸微血管內皮原代細胞

大鼠腸微血管內皮細胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態系統。微血管是極細微的血管，管徑平均為6-9μm，連于動、靜脈之間，互相連接成網狀。微血管壁薄，管徑較小，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液與組織之間進行物質交換。其管壁主要由一層內皮細胞構成，在內皮外面有一薄層結締組織。另外還常可見到一種扁而有突起的細胞貼在微血管的管壁外面，稱為周細胞。

產品名稱：大鼠腸微血管內皮細胞

組織來源：腸組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腸微血管內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠腸微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒

Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)試劑盒

Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉錄復合體(GTC)試劑盒 進口分裝

Deererythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒

載玻片細胞脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內皮型合成酶(eNOS)試劑盒

豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human peosidine ELISA Kit (Peosidine) 人戊糖素(Peosidine)試劑盒

HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 人β內啡肽受體(β-EPR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTP試劑盒人Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)試劑盒規格：96T/48T

組織D-葡萄糖激酶法定量試劑盒20次

HumanProstaglandinE2，PG-E2ELISAKit人前列腺素E2(PGE2)試劑盒規格：96T/48T

小鼠髓過氧化物酶   英文名稱：   Mouse Myeloperoxidase   規格：      英文縮寫：   MPO

小鼠巨噬細胞趨化蛋白-1   英文名稱：   monocyte chemotactic protein 1   規格：      英文縮寫：   MCP-1

小鼠巨噬細胞趨化蛋白-3   英文名稱：   monocyte chemotactic protein 3   規格：      英文縮寫：   MCP-3

小鼠M-能受體結合力   英文名稱：   M—cholinoceptor binding capacity   規格：      英文縮寫：   MCBC

IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein

NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經元素3抗原

ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標簽)

FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白

A-375[A375]細胞，惡性黑色素瘤細胞 白血病細胞,Jurk. Clone E6-1細胞 人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]  MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞)     SW-13細胞，腎上腺皮質腺癌細胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細胞 豬原代乳腺上皮細胞 小鼠原代頜下腺上皮細胞

大鼠腸微血管內皮原代細胞BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態發生蛋白4(抗原)

CFD Protein Human 重組人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CSF2RB Protein Rat 重組大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 標簽)

KIT重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。