大鼠腓腸肌原代細胞

大鼠腓腸肌細胞分離自小腿肌肉組織；腓腸肌位于小腿后面的皮下，是一個淺表的肌肉，當人體站立時，可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側群淺組肌肉，有內、外二頭，內側頭起自股骨內側髁上的三角形隆起，外側頭起自股骨外側髁的近側端，在二頭的深面各有一滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大，在腘窩下角彼此鄰近，所成夾角多為25°～30°，此肌下行與比目魚肌移行為跟腱，止于跟骨結節。腓腸肌的動脈發自腘動脈、靜脈與動脈伴行，注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經全部來自脛神經。包括內、外側肌神經。腓腸肌在行走及站立時能提足跟向上，直立時，腓腸肌和比目魚肌都參加強固膝關節，并調節小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕，可以切取腓腸肌內側頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉。腓腸肌還可影響足的縱弓，該肌癱瘓或時，足縱弓將加深。該肌由脛神經支配，股骨髁上骨折時，因腓腸肌收縮遠側端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉。腓腸肌細胞屬于骨骼肌細胞的一種，骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。骨骼肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

產品名稱：大鼠腓腸肌細胞

組織來源：骨骼肌組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腓腸肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠腓腸肌經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA 試劑盒

Human urokinase (UK) ELISA Kit 人(UK)試劑盒

HumanoligomericproteinELISAKit 人寡聚蛋白(oligomeric)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineaPiglipidperoxlde,LPO試劑盒豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞高質化線粒體分離試劑盒10次

MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒規格：96T/48T

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4(CTLA-4/CD152)試劑盒E

Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK試劑盒人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)試劑盒規格：96T/48T

組織EPHB4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanProgesterone，PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)試劑盒規格：96T/48T

人周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit

人軸突生長誘向因子1(n1)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human n1 (Nein 1) ELISA Kit

人軸突生長誘向因子4(n4)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human n4 (Nein 4) ELISA Kit

CD2重組大鼠 CD2 蛋白  Protein

Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1 0.5mgFut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 階段特異性胚胎表面抗原-1抗原

PARK7重組人 PARK7 / DJ-1 蛋白 (His 標簽) Protein

AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白

ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白

ACHN, 人腎細胞腺癌細胞 Human  NOV Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標簽)  非洲綠猴腎細胞;VERO  LTEP-a-2細胞，人肺腺癌細胞 猴腎細胞系,VERO E6細胞 CM-M050小鼠卵巢顆粒細胞大鼠腦膠質瘤細胞;C6 豬原代卵巢內膜細胞 兔原代眼外肌成纖維細胞

大鼠腓腸肌原代細胞蛋白激酶Cδ(PKCδ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 標簽)

AHSP重組人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。