大鼠肺泡巨噬原代細胞

大鼠肺泡巨噬細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛(先天性免疫)和特異性防衛(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。肺泡巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細胞儲存器官，為結核病的研究提供了重要的材料。

產品名稱：大鼠肺泡巨噬細胞

組織來源：肺組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠肺泡巨噬采用PBS灌注結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠肺泡巨噬經CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

小鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒

Rat basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒

HumanelonginELISAKit 人延伸蛋白(elongin)試劑盒 進口分裝

HumanADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)試劑盒

正常女性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit小鼠抗肌內膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒

小鼠天門冬酸基轉移酶(AST)試劑盒 96T/48T

Human chondroitin sulfate (CS) ELISA Kit 人軟骨素(CS)試劑盒

HumanMannoseELISAKit 人甘露糖(Mannose)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2試劑盒雞轉化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞RyR受體蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseesogen,EELISAKit小鼠雌激素(E)試劑盒規格：96T/48T

脂肪酶（LPS）試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣

醇脫氫酶（ADH）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

脂氧合酶（LOX）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

酰基轉移酶（AAT）試劑盒   可見分光光度法   10管/9樣

CD4重組大鼠 CD4 蛋白 (His 標簽) Protein

Connexin-45(CX45 0.5mgConnexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原)

ULBP2重組人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白  Protein

ADSL Protein Human 重組人 ADSL / Adenylosuccinate Lyase 蛋白 (His 標簽)

FCGR1 Protein Mouse 重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His 標簽)

ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 人細胞裂解液   NAMALWA(人Butt's淋巴瘤細胞)     IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液   PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞) 豬原代肺成纖維細胞 小鼠原代髓核細胞

大鼠肺泡巨噬原代細胞Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)

ACPP Protein Human 重組人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 標簽)

CADM3重組小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標簽) Protein

LIFR Protein Rat 重組大鼠 LIFR 蛋白 (His 標簽)

TXNL4B重組人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 標簽) Protein