詳細介紹
大鼠腹膜毛細血管內皮原代細胞
大鼠腹膜毛細血管內皮細胞分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細胞和間質(結締組織、纖維、毛細血管、淋巴管)構成,藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經組織經由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積最大、配布最復雜的漿膜,由皮及少量結締組織構成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續、移行,共同圍成不規則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜的主要生理功能:①分泌功能;②吸收功能;③再生能力;④防御功能;⑤調理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細血管,毛細血管上有不同的孔徑;腹膜的毛細血管和毛細血管后靜脈是進行溶質交換的主要場所。
英文名稱 | Rat Peritoneal Capillary Endothelial Cells | 組織來源 | 腹膜 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8228 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:大鼠腹膜毛細血管內皮細胞
組織來源:腹膜
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠腹膜毛細血管內皮細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的大鼠腹膜毛細血管內皮采用膠原酶-蛋白酶聯合消化法結合化學試劑抑制法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠腹膜毛細血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒
Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒
Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 進口分裝
Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒
植物氨含量熒光定量試劑盒20次
Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒
豬(EPI)ELISA 試劑盒
Human kallikrein 11 (KLK 11) ELISA Kit 人11(KLK 11)試劑盒
GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANG(Humanangiostatin)ELISAKit人血管抑素/血管穩定蛋白
血液(CO2)濃度酶偶聯反應比色法定量試劑盒20次
PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit豬內皮型合成酶(eNOS)試劑盒
致病性大腸桿菌(EPEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
單增李斯特菌(LM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
球菌(SA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
甲型副氏菌(SPA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CD5重組大鼠 CD5 蛋白 Protein
FLG(filaggrin 0.5mgFLG(filaggrin)peptide 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原
CD164重組人 CD164 / Endolyn 蛋白 (His 標簽) Protein
ADM Protein Human 重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白
FGFR1 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標簽)
AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞) 人神經細胞HN 正常大鼠腎細胞;NRK-52E 胸膜細胞瘤,SMC-1細胞 RIN-m細胞,褐鼠胰島素瘤上皮細胞 SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人細胞裂解液 豬骨骼肌衛星細胞永生化細胞 人原代臍靜脈內皮細胞
大鼠腹膜毛細血管內皮原代細胞Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1 0.5mgFut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 階段特異性胚胎表面抗原-1抗原
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白
CD2重組大鼠 CD2 蛋白 Protein
ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白
PARK7重組人 PARK7 / DJ-1 蛋白 (His 標簽) Protein