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大鼠肝竇內皮原代細胞

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更新時間:2025-05-13 13:50:54瀏覽次數:26

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?
貨號 YS-01X7162 應用領域 化工,生物產業
主要用途 僅供科研實驗    
大鼠肝竇內皮原代細胞公司出售的產品:大鼠原代尿道上皮細胞 Calu-1(人肺癌細胞) BT-549 人導管癌細胞 1ml/T75 HEC-1-B 人內膜腺癌細胞 U87-GFP 人腦膠質瘤綠色熒光細胞 小鼠原代視網膜前體細胞

詳細介紹

本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

大鼠肝竇內皮原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠肝竇內皮采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠肝竇內皮經CD31CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

大鼠肝竇內皮原代細胞

組織來源

肝臟組織

英文名稱

Rat Hepatic   Sinusoidal Endothelial Cells

貨號

YS-01X7162

產品規格

5×10?Cells/T25培養瓶

用途

僅供科研實驗

 

大鼠肝竇內皮原代細胞
細胞簡介:

大鼠肝竇內皮細胞細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內皮細胞(SEC)是肝臟內所占比例最高的非實質細胞,位于肝竇腔與肝細胞之間,具有物質轉運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒有的窗孔結構、細胞間連結松散、內皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時,肝竇內皮細胞窗孔逐漸減少或消失,內皮下基膜形成,產生類似于連續型毛細血管的結構,這一過程稱為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起,其過程極復雜,在多種肝病的發病前期階段均有出現,近年來受到廣泛關注。

培養信息:

大鼠肝竇內皮原代細胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

大鼠肝竇內皮原代細胞

細胞培養方法:

大鼠肝竇內皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

公司產品:大鼠肝竇內皮原代細胞

小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒

Rat ai endomysial aibody IgA (EMA IgA) ELISA Kit 大鼠抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒

HumanHemoglobinH,HbHELISAKit 人血紅蛋白H(HbH)試劑盒 進口分裝

Humanamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42試劑盒96T人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒

植物多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量試劑盒20

MonkeyCollageype,ColELISAKit猴Ⅳ型膠原(Col)試劑盒

豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PCP)ELISA 試劑盒

Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體(MSA)試劑盒

Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 豬基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化終末產物

血液腎素(renin)熒光定量試劑盒20

MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒

植物C(VC)ELISAkit   ELISA. 

α-銀環蛇毒素(α-BGT)ELISAKit   ELISA. 

大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISAKit   ELISA. 

霉毒素(AFT)ELISAKit   ELISA.

IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標簽) Protein

NT-3 神經生長因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經生長因子-3(抗原)

ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein

CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標簽)

ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白

APOL1 Others Human APOL1 / apolipoprotein L1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   IL6ST Others Human IL6ST / gp130 / CD130 人細胞裂解液   CM-R030大鼠腸粘膜上皮細胞原代成纖維細胞特制基礎 原代比格犬軟骨細胞 小鼠原代胎盤間充質干細胞

大鼠肝竇內皮原代細胞IL-5 peptide 白細胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白細胞介素5抗原

AIF1 Protein Human 重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標簽)

IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein

DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

CNTF重組人 CNTF 蛋白 (His 標簽) Protein


操作步驟:

大鼠肝竇內皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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