詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠肝竇內皮采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠肝竇內皮經CD31、CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠肝竇內皮原代細胞 | 組織來源 | 肝臟組織 |
英文名稱 | Rat Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7162 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
大鼠肝竇內皮細胞細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內皮細胞(SEC)是肝臟內所占比例最高的非實質細胞,位于肝竇腔與肝細胞之間,具有物質轉運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒有的窗孔結構、細胞間連結松散、內皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時,肝竇內皮細胞窗孔逐漸減少或消失,內皮下基膜形成,產生類似于連續型毛細血管的結構,這一過程稱為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起,其過程極復雜,在多種肝病的發病前期階段均有出現,近年來受到廣泛關注。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品:
小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒
Rat ai endomysial aibody IgA (EMA IgA) ELISA Kit 大鼠抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒
HumanHemoglobinH,HbHELISAKit 人血紅蛋白H(HbH)試劑盒 進口分裝
Humanamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42試劑盒96T人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒
植物多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量試劑盒20次
MonkeyCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit猴Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒
豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒
Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體(MSA)試劑盒
Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 豬基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化終末產物
血液腎素(renin)熒光定量試劑盒20次
MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒
植物C(VC)ELISAkit ELISA.
α-銀環蛇毒素(α-BGT)ELISAKit ELISA.
大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISAKit ELISA.
霉毒素(AFT)ELISAKit ELISA.
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NT-3 神經生長因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經生長因子-3(抗原)
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標簽)
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 IL6ST Others Human 人 IL6ST / gp130 / CD130 人細胞裂解液 CM-R030大鼠腸粘膜上皮細胞原代成纖維細胞特制基礎 原代比格犬軟骨細胞 小鼠原代胎盤間充質干細胞
大鼠肝竇內皮原代細胞IL-5 peptide 白細胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白細胞介素5抗原
AIF1 Protein Human 重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標簽)
IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
CNTF重組人 CNTF 蛋白 (His 標簽) Protein
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。