大鼠骨髓間充質干原代細胞

大鼠骨髓間充質干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養條件要求較高，在培養過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。

產品名稱：大鼠骨髓間充質干細胞

組織來源：骨髓

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠骨髓間充質干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠骨髓間充質干經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

小鼠肝細胞生長因子受體(HGFR/ c-MET)試劑盒

Human varicella zoster virus IgG (VZV-IgG) ELISA Kit 人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)試劑盒

HumanAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-ophoblastaibody,ATA試劑盒人抗滋養膜細胞抗體(ATA)試劑盒規格：96T/48T

植物氧化應激活性氧(ROS)比色法定量試劑盒(超氧陰離子)20次

Humanansferfactor，TFELISAKit人轉移因子(TF)試劑盒規格：96T/48T

豬催乳素(PRL)試劑盒

Human macrophage chemotatic factor (MCF) ELISA Kit 人巨噬細胞趨化因子(MCF)試劑盒

Porcinemyeloperoxidase,MPOELISAKit 豬髓過氧化物酶(MPO)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha1-AGP(HumanAlpha1-Acidglycoprotein)ELISAKit人α1酸性糖蛋白

血液0酸二酯酶2(PDE2)活性熒光定量試劑盒10次

Mouseβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)試劑盒

人粘蛋白5AC(MUC5AC)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human MUC5AC (Mucin 5 Subtype AC) ELISA Kit

人粘蛋白5B(MUC5B)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human MUC5B (Mucin 5 Subtype B) ELISA Kit

人粘蛋白7(MUC7)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit

人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human MEC/CCL28 (Mucosae Associated Epithelia Chemokine) ELISA Kit

IL25重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽) Protein

衰變加速因子(DAF)重組蛋白 Recombinant Decay Accelerating Factor (DAF)

EIF5A重組人 EIF5A 蛋白 Protein

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白

HA Protein H4N6 重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

BRL細胞，肝細胞 人前列腺癌細胞,9L-E細胞 人上皮細胞RNAHMEpiC miRNA5 μg  YAC-1(小鼠淋巴瘤細胞)     RL95-2, 人子宮內膜腺癌細胞系 羊膜細胞,H.A.細胞 WERI-Rb-1(人視網膜母細胞瘤)  EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501 羊原代附睪上皮細胞 兔原代乳腺導管上皮細胞

大鼠骨髓間充質干原代細胞饑餓素-O-乙酰基轉移酶(GOAT)重組蛋白 Recombinant Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)

AIM2 Protein Human 重組人 AIM2 蛋白 (GST 標簽)

OPCML重組小鼠 OBCAM / OPCML 蛋白 (His 標簽) Protein

CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白

IL12A & IL27B重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白 Protein