大鼠脊髓神經干原代細胞

大鼠脊髓神經干細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形（蝴蝶型）灰質區，主要由神經細胞構成；在灰質區周圍為白質區，主要由有髓神經纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經（稱為脊神經）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節，31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是，在腦脊髓等所有神經組織中，不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同，分布也不同。神經干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態下具有增殖、遷移，并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力，已成為神經系統損傷修復和再生研究的熱點，體外建立穩定的神經干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。神經干細胞在培養3-4d后，可形成神經球，神經球在培養基中呈懸浮生長。

產品名稱：大鼠脊髓神經干細胞

組織來源：脊髓組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態 球形

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%，Accutase

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠脊髓神經干采用消化后差速貼壁，結合神經干細胞專用培養基培養篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠脊髓神經干經Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

豚鼠主要組織相容性復合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒

Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)試劑盒

Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCrosslaps,Cr試劑盒人骨膠原交聯(Cr)試劑盒規格：96T/48T

組織DYRK1A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

humanProstaglandinF，PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)試劑盒規格：96T/48T

豚鼠內皮型合酶(NOS3)試劑盒 ，英文名： NOS3 ELISA Kit

Human replication protein A (RPA-70) ELISA Kit 人復制蛋白A(RPA-70)試劑盒

Rabbitsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 兔子可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBAX(RabbitBcl-2AssaciatedXprotein)ELISAKit兔Bcl-2相關X蛋白

線蟲β-半乳糖苷酶比色法定量試劑盒20次

rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規格：96T/48T

人瘦素受體(LEPR)ELISAKit   ELISA. 

人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISAKit   ELISA. 

人血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISAKit   ELISA.

豬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒

Human ai DNA enzyme B aibody (ai-DNase B) ELISA Kit 人抗DNA酶B抗體(ai-DNase B)試劑盒

PorcineTissuefactor,TFELISAKit 豬組織因子(TF)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforALD(HumanAldolase)ELISAKit人縮酶

血液離子(Na)濃度化學比色法定量試劑盒20次

MouseVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒

CD276 Others Human 人 CD276 / B7-H3 人細胞裂解液   SW626(人癌細胞)     CM-R118大鼠虹膜色素上皮細胞原代滑膜皮細胞特制基礎無血清Many types of cells包裝：500/人癌細胞;MDA-MB-157 小鼠原代中耳上皮細胞 大鼠原代表皮干細胞

大鼠脊髓神經干原代細胞基質金屬蛋白酶8(MMP8)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8)

IL1RAPL2 Protein Human 重組人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白

TXN重組小鼠 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein

NTRK2 Protein Canine 重組狗 TrkB / NTRK2 蛋白

CGREF1重組人 CGREF1 蛋白 Protein