大鼠角膜基質原代細胞

大鼠角膜基質細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。角膜基質層是角膜的主要組成部分，占據角膜厚度的90%，由角膜基質細胞、膠原纖維和細胞外基質構成。角膜基質層缺損的修復主要由角膜基質細胞的增殖及分泌細胞外基質完成。角膜基質層具有結構規整，透明度高的特點，正常情況下角膜基質細胞分泌組成基質層的成分，維持角膜的透明度，此細胞對于角膜損傷的修復具有重要意義。角膜基質細胞，存在于角膜基質層中，在正常情況下，處于靜止狀態。但當角膜損傷時，不同上皮來源的因子及環境信號，將影響角膜基質細胞的應答反應，決定著角膜能否被修復。

產品名稱：大鼠角膜基質細胞

組織來源：眼角膜組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠角膜基質采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠角膜基質經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒

Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)試劑盒 進口分裝

HumancyclophilinA,CyPA試劑盒人嗜環蛋白/親環素A(CyPA)試劑盒

組織GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)試劑盒

豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒 ，英文名： iFABP ELISA Kit

Human multidrug resistance associated protein (MRP) ELISA Kit 人多藥耐藥相關蛋白(MRP)試劑盒

rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBetaGD(HumanBeta-glucuronidase)ELISAKit人β葡萄糖酸苷酶

細菌腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續循環比色法定量試劑盒20次

rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit兔子肝細胞生長因子(HGF)試劑盒規格：96T/48T

人中期因子(MK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人特異生長因子/相關因子(TSGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

PTPN11重組小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

泛素(Ub)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

PRKAR1A重組人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)

EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液   FD4細胞，人淋巴細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞 小鼠畸胎瘤細胞,F9細胞 CM-H095人骨骼肌細胞CM-R014大鼠氣管和支氣管上皮細胞100mL 小鼠原代胰腺星狀細胞 人原代踝或膝滑成纖維細胞

大鼠角膜基質原代細胞Morphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯物 10mgMorphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯物

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

CXCL13重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein

PREP Protein Mouse 重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白

DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。