大鼠角膜內皮原代細胞

大鼠角膜內皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。角膜的高度透明性和光學性是正常發揮生理功能的必要條件之一，而角膜內皮細胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內皮細胞是角膜內層的單層細胞，構成了后彈力層和房水之間的物理屏障，通過離子“泵"功能調節角膜中離子濃度和水分，維持角膜的半脫水狀態，保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內皮細胞功能出現紊亂，常導致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內皮細胞主要功能有：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能；②角膜內皮細胞對角膜透明性有重要作用；③角膜內皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內Na+梯度，防止水分滲入角膜內，維持角膜實質層相對脫水狀態，維持透明性。

產品名稱：大鼠角膜內皮細胞

組織來源：眼角膜組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠角膜內皮采用混合膠原酶消化結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠角膜內皮經NSE（神經元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

豚鼠白介素22(IL-22)試劑盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit

Human ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)試劑盒

RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit 兔子白介素1β(IL-1β)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-EP(RabbitBeta-Endorphin)ELISAKit兔子β內啡肽

細菌樣品二維電泳裂解液用于細菌蛋白二維電泳

RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)試劑盒規格：96T/48T

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 ，英文名： SOD ELISA Kit

Human polymorphonuclear leukocyte elastase (PMN Elastase) ELISA Kit 人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)試劑盒

rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBetaGD(MouseBeta-glucuronidase)ELISAKit小鼠β葡萄糖酸苷酶

細菌纖維素酶(cellulase)活性熒光定量試劑盒20次

RabbitHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)試劑盒規格：96T/48T

人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒試劑盒   人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒、人脂肪型脂肪酸結合蛋白試劑盒試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒   人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒、人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人髓樣分化因子初次應答基因88試劑盒   人髓樣分化因子初次應答基因88試劑盒   規格型號：96T/48T   人髓樣分化因子初次應答基因88試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人髓樣分化因子初次應答基因88試劑盒、人髓樣分化因子初次應答基因88 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G試劑盒   人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G試劑盒   規格型號：96T/48T   人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G試劑盒、人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

FGF1重組人 aFGF / FGF1 蛋白 Protein

結合球蛋白(CBG)重組蛋白 Recombinant Corticosteroid Binding Globulin (CBG)

SMR3B重組人 SMR3B 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CDK1 Protein Human 重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

PLA2G12B重組小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 蛋白 (His 標簽) Protein

2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶聯牛血清白蛋白 1mg2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶聯牛血清白蛋白

USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (N-SUMO) Protein

AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽)

LTBR Protein Rat 重組大鼠 LTBR / ???

大鼠角膜內皮原代細胞CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環腺苷酸應答元件結合蛋白(抗原)

AK1 Protein Human 重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 標簽)

CD274重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 標簽) Protein

NTRK3 Protein Mouse 重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 標簽)

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。