大鼠結腸黏膜上皮原代細胞公司出售的產品：人原代表皮角化細胞 Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞) 5637(HTB-9) 人膀胱癌細胞 1ml/T75 MV3 人黑色素瘤細胞 HT-29 人結腸癌細胞 小鼠原代骨骼肌成纖維細胞

大鼠結腸黏膜上皮原代細胞

大鼠結腸黏膜上皮細胞分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養方法，為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。

產品名稱：大鼠結腸黏膜上皮細胞

組織來源：結腸組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠結腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠結腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒

Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠血管緊張素轉化酶(ACE)試劑盒

Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)試劑盒 進口分裝

HumanCyclophosphamide,CTX試劑盒人環0酰胺(CTX)試劑盒

組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人脊髓灰質病毒IgG(PV-IgG)試劑盒

豬白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒

Human ai IgE receptor aibody ELISA Kit 人抗IgE受體抗體試劑盒

Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforALCAMELISAKit大鼠白細胞活化黏附因子

血液(UROKINASE)活性比色法定量試劑盒20次

MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit小鼠血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)試劑盒

人粒細胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒   96T/48T

人中期因子(MK)試劑盒   96T/48T

人脂氧素A4(LXA4)試劑盒   96T/48T

人脂0壁酸(LTA)試劑盒   96T/48T

ADAM15重組人 ADAM15 / MDC15 蛋白 Protein

嗅素4(OLFM4)重組蛋白 Recombinant Olfactomedin 4 (OLFM4)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

IL22RA2 Protein Human 重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽)

CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人細胞裂解液   HCC827(人非小細胞肺癌細胞)     CL-0364HuT 78(人T淋巴細胞白血病細胞)中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]  CL-0033BGC823(人胃癌細胞)  P815 小鼠肥大細胞癌細胞 小鼠原代胰島細胞 雞原代氣管上皮細胞

大鼠結腸黏膜上皮原代細胞α1-酸性糖蛋白(α1AGP)重組蛋白 Recombinant Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

DDC重組小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 蛋白 Protein

ENPP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ENPP3 / CD203c 蛋白

PPIL1重組人 PPIL1 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。