大鼠精原原代細胞

大鼠精原細胞分離自睪丸組織；睪丸呈微扁的卵圓形，表面光滑，覆蓋著鞘膜臟層；深部是質地堅韌的白膜，在睪丸后緣增厚并進入睪丸，形成睪丸縱膈，縱膈發出許多睪丸小隔深入睪丸實質，將實質分為睪丸小葉，數量約為100～200。每個小葉內約有2～4條生精小管，具有產生精子的作用；生精小管之間的結締組織中有睪丸間質細胞，具有產生雄激素的作用。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管)，精直小管進入睪丸縱膈形成睪丸網，之后睪丸網發出12～15條輸出小管通過睪丸后上緣進入附睪。生精小管的生精上皮是精子產生的地方，由生精細胞和支持細胞構成，成人的生精小管有30～70cm長。精子的產生過程包括生精細胞的分化、支持細胞的作用、雄激素的調節等。生精細胞并不是一種細胞，它是多種細胞的統稱，包括精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、精子細胞、精子。前者依次發育分化為后者，且依次從生精上皮的基部到管腔面排列，最終形成精子進入到管腔之中，并借助生精上皮外側的肌樣細胞的收縮作用向下一級管腔移動。精原細胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細胞經過多次有絲分裂而形成的細胞。原始的胚細胞經分化形成精原細胞，精原細胞經復制形成初級精母細胞，初級精母細胞經過減數第一次分裂后形成次級精母細胞，再經過減數第二次分裂形成精細胞。精細胞經過變形最終形成精子。精原細胞屬于雄性生殖細胞的早期發育階段，能不斷地進行有絲分裂，增加細胞數量，并分化為精母細胞。精原細胞貼近基膜，細胞呈圓形，核大而圓，梁色深。精原細胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力，而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中，通過精原細胞的分裂和分化，由精原細胞產生精母細胞，進入成熟分裂，因而通過增殖可大大增加精母細胞的數量。按理論推算，一個精原細胞通過數次細胞分裂，可形成上百個初級精母細胞。但在生精過程早期，生精細胞很易發生變性，故實際上少于這個數字。在精原細胞的增殖過程中，有一部分Ad型精原細胞不再繼續分裂，而是保留下來，成為新的精原干細胞，因此通過增殖不僅能使精原干細胞不斷得到更新，且能使精原干細胞保持一定數量，從而使精子的產生持續地進行下去，不會枯竭。

產品名稱：大鼠精原細胞

組織來源：睪丸

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基：含FBS、生長添加劑、GDNF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：圓形、橢圓形

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠精原細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的優良培養狀態。

方法簡介

實驗室分離的大鼠精原采用混合酶多步消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的大鼠精原經AP(堿性磷酸酶)免疫組化染色鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒

Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠血管生長素(ANG)試劑盒

Humanadrenalcoexaibody,ACAELISAKit 人腎上腺皮質抗體(ACA)試劑盒 進口分裝

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMW試劑盒人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒

組織HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次

Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒

豬白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒

Human ai Q thermal aibody (ai-Q-Ab) ELISA Kit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)試劑盒

PorcineIerleukin1,IL-1ELISAKit 豬白介素1(IL-1)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAKA(HumanAi-keratinaibody)ELISAKit人抗角蛋白抗體

血液尿酸含量酶偶聯比色法定量試劑盒20次

MouseUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit小鼠高敏三甲狀腺原(u-T3)試劑盒

人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA. 

人抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA. 

人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit   ELISA.

CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)

SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein

IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標簽)

IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白

CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液   CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 人細胞裂解液   腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)  滋養層細胞TM-prf  CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細胞裂解液   EAC 小鼠艾氏腹水癌細胞 小鼠原代牙周膜成纖維細胞 兔原代睪丸間質細胞

大鼠精原原代細胞甘露聚糖結合凝集素關聯絲蛋白酶2(MASP2)重組蛋白 Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

PTK6重組小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。