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大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

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    上研生
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    上海市

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更新時間:2025-05-13 15:07:32瀏覽次數:28

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?
貨號 YS-01X7668 應用領域 化工,生物產業
主要用途 僅供科研實驗    
大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞公司出售的產品:人原代肺大靜脈內皮細胞 Lec1(倉鼠細胞) U14 小鼠頸癌細胞 1ml/T75 NCI-H292 人肺癌細胞(淋巴結轉移) RKO-AS45-1 人結腸癌轉基因細胞 小鼠原代腹腔巨噬細胞

詳細介紹

本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠口腔粘膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠口腔粘膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

組織來源

口腔黏膜組織

英文名稱

見說明

貨號

YS-01X7668

產品規格

5×10?Cells/T25培養瓶

用途

僅供科研實驗

 

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞
細胞簡介:

大鼠口腔粘膜成纖維細胞分離自口腔粘膜組織;口腔(oral cavity)是消化道的起始部分。前借口裂與外界相通,后經咽峽與咽相續??谇粌扔醒?、舌等器官。口腔的前壁為唇、側壁為頰、頂為腭、口腔底為黏膜和肌等結構??谇唤枭?、下牙弓分為前外側部的口腔前庭(oral vestibule)和后內側部的固有口腔(oral cavity proper);當上、下頜牙咬合時,口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

培養信息:

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

培養基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%;CO25%

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

細胞培養方法:

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

公司產品:大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒

Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒

Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒 進口分裝

HumanCytotoxin-associatedprotein,CagA試劑盒人細胞毒素相關蛋白A(CagA)試劑盒

組織IKKβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

HumanplasminogenactivatorinhibitorPAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒

小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Phosphoglucomase (PGM) ELISA Kit 0酸葡萄糖變位酶(PGM)試劑盒

HumanAngiotensinaseELISAKit 人血管緊張肽酶(Angiotensinase)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenIerferonγ,IFN-γ試劑盒雞γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規格:96T/48T

載玻片細胞ERBETA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20

Mouseglycogensyhasekinase,GSKELISAKit小鼠糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒規格:96T/48T

大鼠粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISAKit   ELISA. 

大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISAKit   ELISA. 

大鼠雌激素受體(ER)ELISAKit   ELISA.

DPP4重組食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 Protein

IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mgIL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原

SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 Protein

IL23R Protein Human 重組人 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標簽)

S100A5 Protein Mouse 重組小鼠 S100A5 蛋白

CEACAM5 Others Human CEACAM5 / CD66e 人細胞裂解液   L-O2(人正常肝細胞)     HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 小鼠原代牙齦成纖維細胞 小鼠原代垂體細胞

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞Melamine/Bov IgG 三聚胺偶聯牛IgG 1mgMelamine/Bov IgG 三聚胺偶聯牛IgG

AKR1C2 Protein Human 重組人 AKR1C2 蛋白 (His 標簽)

ACVRL1重組食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 蛋白  Protein

CTNNB1 Protein Mouse 重組小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標簽)

CAMKV重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標簽) Protein


操作步驟:

大鼠口腔粘膜成纖維原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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