詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
實驗室分離的大鼠淋巴血管內皮采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠淋巴血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠淋巴血管內皮原代細胞 | 組織來源 | 淋巴管 |
英文名稱 | Rat Lymphatic Vascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X8240 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
大鼠淋巴血管內皮細胞分離自淋巴血管組織;淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態結構與靜脈相似,但管徑較細,管壁較薄,瓣膜較多且發達,外形呈串珠狀。淋巴管根據其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經過一個或多個淋巴結,從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應。當局部感染時,細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴管內皮細胞(LEC)是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮,是構成淋巴管壁的主要結構,參與維持體液平衡,調節淋巴細胞再循環和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉移密切相關。淋巴管內皮細胞主要功能:①調節體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統的重要組成部分。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結核。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠淋巴血管內皮細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品:
兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒
People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒E
Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandynorphin,Dyn試劑盒人強啡肽(Dyn)試劑盒規格:96T/48T
組織P38a激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒規格:96T/48T
豚鼠谷轉酶(ALT)試劑盒 ,英文名: ALT ELISA Kit
Human calmodulin (CAM) ELISA Kit 人鈣調素(CAM)試劑盒
rabbitEndostatin,ESELISAKit 兔子內皮抑素(ES)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBACE2ELISAKit大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2
線蟲繁殖培養試劑盒10次
rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒規格:96T/48T
小鼠細胞色素氧化酶(CC0)試劑盒 96T/48T
小鼠(Cyt-C)試劑盒 96T/48T
小鼠細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒 96T/48T
小鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒 96T/48T
TNFSF12重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)
TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白
MERTK Protein Mouse 重組小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 標簽)
CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細胞裂解液 IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 CM-H046人肝星形細胞中和液TNS b16 小鼠黑色素瘤細胞 小鼠原代嗅球神經干細胞 人原代結腸粘膜上皮細胞
大鼠淋巴血管內皮原代細胞凋亡相關因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽)
CD24重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 Protein
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽)
NAPG重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標簽) Protein
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。