大鼠卵泡膜原代細胞

大鼠卵泡膜細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于中央，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和神經。哺乳動物的卵巢內卵泡的發育需要相關激素的調節才能完成，垂體（卵泡刺激素和黃體生成素）使原始卵泡開始發育，其過程中還產生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體的作用下協同合成的，卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞，并轉變為雌激素。因此，卵泡膜細胞在生殖內分泌調節中占有關鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用，對于與性激素有關的婦產科疾?。ㄈ缍嗄衣殉簿C合癥、卵巢癌等）的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發育的過程中，卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性，參與構成卵母細胞和顆粒細胞發育的微環境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調節膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關報道，但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。

產品名稱：大鼠卵泡膜細胞

組織來源：卵巢組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

兔子腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor B (VEGF-B) ELISA Kit 人血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒

Humanueinsulin,TIELISAKit 人真胰島素(TI)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanErythropoietieceptor,EPOR試劑盒人紅細胞生成素受體(EPOR)試劑盒規格：96T/48T

組織RSK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanosteonectin，ONELISAKit人骨粘連蛋白(ON)試劑盒規格：96T/48T

豚鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 ，英文名： Lebtospira ELISA Kit

Human telomerase (TE) ELISA Kit 人端粒酶(TE)試劑盒

Rabbittumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 兔子壞死因子相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF(Rabbitbasicfibroblastgrowthfactor)ELISAKit兔子堿性成纖維細胞生長因子

細菌糖酵解IMViC試劑盒20次

rabbitIerferonγ,IFN-γELISAKit兔子γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規格：96T/48T

人轉鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit

人游離睪(F-TESTO)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit

人轉移因子(TF)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit

人轉運蛋白1(TNPO1)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit

CD3D重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 標簽) Protein

MMP-2 基質金屬蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基質金屬蛋白酶-2(多肽抗原)

CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽) Protein

ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白

BTLA Protein Mouse 重組小鼠 BTLA 蛋白

CHO-AA8細胞，轉入Tet-off調控含EGFP基因的CHO細胞 H9c2(2-1)(大鼠心肌細胞) 615小鼠前胃癌瘤株;Fc  人纖維環細胞HAFC  SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 小細胞肺癌細胞,NEI-H209細胞 ECV304(人臍靜脈內皮細胞株) 小鼠原代心臟微血管內皮細胞 大鼠原代腹膜間皮細胞

大鼠卵泡膜原代細胞凋亡相關因子(FAS)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis (FAS)

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白

AIMP1重組小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 Protein

LTBR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (Fc 標簽)

KCNIP3重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。