化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔腹膜間皮采用混合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔腹膜間皮經PCK、Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔腹膜間皮原代細胞 | 組織來源 | 腹膜 |
英文名稱 | Rabbit Peritoneal Mesothelial Cells | 貨號 | YS-01X8346 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔腹膜間皮細胞分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜，主要由間皮細胞構成，藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和組織經由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積大、配布復雜的漿膜，由皮及少量結締組織構成，薄而光滑，呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續、移行，共同圍成不規則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液，在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮，是覆蓋于腹膜表面的一層細胞。間皮細胞是構成間皮的細胞，正常大小約為15-25微米，細胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑，使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護，不會互相磨損受傷。而間皮所生產的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質來達成，分泌物多半為細胞外基質、玻尿酸類物質。
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腹膜間皮細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
SF767細胞，人腦瘤細胞 陰溝腸桿菌 人主動脈內皮細胞總RNAHAEC NA | Rhesus antibody Rh GDIA2/ARHGDIB 轉移抑制基因GDIA2抗體 規格 0.1ml |
AACT(Human Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰白酶Multi-class antibodies規格： 48T | IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗IgG 0.1ml |
IRX5： Iroquois同源蛋白5抗體 0.2ml | anti-DNase B(Human anti-deoxyribonuclease B) ELISA Kit 人抗DNA酶B抗體 96T |
Rhesus antibody Rh RERG Ras相關雌激素調節生長抑制蛋白 規格 0.2ml | Anti-LDL/FITC 熒光素標記低密度脂蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-STXBP1(Ser515) 0酸化突觸前膜胞內蛋白抗體 規格 0.1ml | AChE ELISA Kit 大鼠乙酰酯酶 96T |
RKO-E6(人結腸癌轉基因細胞) 5×106cells/瓶×2 | 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) |
801-D細胞，人巨細胞性肺癌細胞 轉入Tet-off調控，含EGFP基因的CHO細胞,CHO-AA8細胞 CM-M026小鼠骨髓基質細胞培養基100mL | Sf-21(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人正常肺上皮細胞;BEAS-2B | CW-2(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
U-87 MG人腦星形膠質母細胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS | 人牙周膜成纖維細胞裂解物HPLFL |
769-P細胞，人腎癌細胞系(769-P) 中國倉鼠倉鼠肺細胞,R1610細胞 CL-0406NCI-H838(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 兔腹膜間皮原代細胞anti-DNase B(Human anti-deoxyribonuclease B) ELISA Kit 人抗DNA酶B抗體 96T |
眼晶狀體上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MAP4K5 Others Human 人 MAP4K5 / MEKKK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H093人顱蓋造骨細胞培養基100mL |
IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 | Rhesus antibody Rh APC70/CRSP70 轉錄激活蛋白crsp70抗體 規格 0.2ml |
phospho-BCAR1 (Tyr249)： 0酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 0.1ml | CM-R016大鼠胰腺星狀細胞培養基100mL |
Anti-TRADD/FITC 熒光素標記有死亡區的壞死因子受體1相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | PHLP： 抑制基因PHLPP抗體 0.2ml |
Anti-CDK2/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | RKO-E6(人結腸癌轉基因細胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網