詳細介紹
兔肝動脈內皮原代細胞
兔肝動脈內皮細胞分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別肝臟的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈肝臟的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內皮細胞是襯于肝動脈內表面的單層扁平上皮,在炎癥時高表達黏附分子,與血流中白細胞表面黏附分子相互作用,從而介導白細胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細胞。它們吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動,包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內皮細胞亦控制一些物質,如白血球進出血管。
英文名稱 | Rabbit Hepatic Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 肝動脈 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8348 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:兔肝動脈內皮細胞
組織來源:肝動脈
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔肝動脈內皮細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的兔肝動脈內皮采用混合酶消化法結合差速貼壁法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔肝動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml |
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ鏈 96T | Anti-Moesin/FITC 熒光素標記膜突蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thrombospondin 2 血小板反應蛋白2/敏感蛋白2抗體 規格 0.2ml | AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質抗體Multi-class antibodies規格: 48T |
HAS2: 透明質酸合成酶2抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗體 規格 0.1ml |
phospho-FOXO4 (Thr451): 0酸化叉頭蛋白4抗體 0.1ml | TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素Multi-class antibodies規格: 48T |
EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Sars結構蛋白表達株;293sars181A 人膀胱上皮細胞培養基 100mL |
人急性早幼粒白血病細胞;HL-60 | PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照) |
LYPD3 Others Mouse 小鼠 LYPD3 / MIG-C4 人細胞裂解液 (陽性對照) | COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 | 兔肝動脈內皮原代細胞AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質抗體Multi-class antibodies規格: 48T |
KU812(人外周血嗜堿性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人間充質干細胞-肝 |
人上皮細胞;MCF-10A | 非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- 畸胎瘤細胞,F9細胞 BEL-7404(肝癌細胞) |
CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野豬 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Rad52/FITC 熒光素標記Rad52抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
osteopontin: 骨橋蛋白抗體(分泌型0蛋白1) 0.1ml | CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SorLA/LRP9: 低密度脂蛋白受體相關蛋白9抗體 0.2ml | phospho-CDC27 (Thr244): 0酸化后期促進復合蛋白3抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標記的驢抗豚鼠IgG 規格 0.1ml | EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。