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詳細介紹
兔肝外膽管上皮原代細胞
兔肝外膽管上皮細胞分離自肝外膽管組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖、先天性膽總管囊腫、原發(fā)性硬化性膽管炎等，都是以膽管上皮細胞為病變的靶位，引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮細胞的病理生理學(xué)特征對研究膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。
英文名稱 | Rabbit Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells | 組織來源 | 膽管 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7983 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔肝外膽管上皮細胞
組織來源：膽管
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝外膽管上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔肝外膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中，通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔肝外膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
人巨細胞白血病細胞株;Mo7e 大鼠卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | Activin A Receptor Type IC： 激活素受體1C抗體 0.2ml |
Anti-HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh A Raf/ARAF A-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細胞表達和分泌的因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh Hyaluronidase2 透明質(zhì)酸酶2/酸酶2抗體 規(guī)格 0.2ml |
HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原) 0.5mg | Hrasls3： HRAS樣抑制因子3抗體 0.2ml |
Goat Anti-Guinea IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh Factor X 10抗體 規(guī)格 0.2ml |
H22 小鼠肝癌細胞 | CL-0453TE-10(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]細胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纖維細胞) | 人細胞;C-33A |
人正常上皮細胞;MCF 10A | 人淋巴細胞;1301 |
原代表皮角化細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 |
犬腎細胞;MDCK/IgR BALB/C小鼠胚成纖維細胞，BALB/3T3細胞 RYTF細胞，兔眼Tenon's囊成纖維細胞 | 兔肝外膽管上皮原代細胞Rhesus antibody Rh Hyaluronidase2 透明質(zhì)酸酶2/酸酶2抗體 規(guī)格 0.2ml |
人胰腺導(dǎo)管癌細胞;CFPAC-1 | CD47 Others Human 人 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) |
家兔骨髓間充質(zhì)干細胞;2012083MSC | 人肺動脈平滑肌細胞HPASMC |
NSC，大鼠干細胞 | Rhesus antibody Rh IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.5ml |
GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse platelet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 96T | U251人膠質(zhì)瘤細胞 |
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MAML2： 主導(dǎo)控制樣蛋白2抗體 0.2ml | H22 小鼠肝癌細胞 |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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